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SLS提取植物DNA 吴亚滨 2013-4-23 提纲 试剂配制 提取步骤 注意事项 试剂配制 sls提取液 1L提取液 名称 浓度 PH 加入量 Tris-Hcl 1M 8 100ml Nacl 2.5M 40ml EDTA 0.5M 8 40ml sls 10g HCL调PH=8 定容： 1L 酚/氯仿/异戊醇 100ml（25:24:1） 名称 体积 Tris饱和酚 25ml 氯仿 24ml 异戊醇 1ml 总体积： 100ml 25:24:1，淡黄色 SLS提取液，无色 其他试剂：异丙醇（-20℃）；70%乙醇 操作步骤 液氮破碎组织，装2.0离心管至0.5处 加SLS提取液800ul，振荡10min 加酚氯仿异戊醇800ul，振荡5min 12000r，4℃,10min 吸取上清液500ul于一1.5ml离心管中 加等体积异丙醇（-20℃）,混匀，-20℃静置30min。 12000r，4℃,5min 倒掉上清，加500ul70%乙醇 12000r，4℃,5min 弃上清，自然晾干 加200ul超纯水，4℃溶解一天 -20℃长期保存 注意事项 Tris-平衡酚具有强腐蚀性，戴手套操作，不要溅入眼中，否则用大量清水冲洗 酚氯仿异戊醇与SLS提取液不相溶，前者位于液面下。 第一次离心前要混匀 没混匀 混匀 离心后上清 离心后上清混浊 充分混匀标准 混匀后静置一段时间后会自然