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高效转染试剂盒 产品简介 百恩维公司生产研发的高效转染试剂盒（HET）可有效地转染各种哺乳动物细胞，并且对细胞基本没有毒性。 可用于转染的细胞包括各种细胞株（如HEK293，NIH3T3，COS7等）和原代细胞（如成纤维细胞，成肌细胞，间充质干细胞，角质细胞，内皮细胞，上皮细胞等）。 转染前以细胞融合度不超过80%为宜。接种密度因所采用的细胞系和细胞的倍增时间而有所不同。一般而言，细胞的接种密度为3～5 × 106 cells/100-mm培养皿，1～2×106 cells/60-mm培养皿或6孔板中为6～8 ×105 cells/孔。 保存室温（1525℃）保存4℃保存一年，-20℃保存一年以上。 产品名称 包装 Buffer A 50ml Buffer B 5ml 标准操作步骤 使用前预热试剂至常温。 转染前一天，接种适量细胞悬液至100-mm培养皿、60-mm培养皿或6孔板中，放置到潮湿37°C 5% CO2 培养箱培养过夜。 次日，吸去细胞培养液，加入新鲜培养液（不含青霉素-链霉素）。 取两根无菌1.5ml eppendorf管，分别记为A、B。按下表，根据培养皿不同而加入不同体积的试剂： 100-mm 培养皿 （含5ml培养基） 60-mm 培养皿 （含2.5ml培养基） 6孔板 （含1ml培养基） A管：500μl Buffer A A管：250μl Buffer A A管：50μl Buffer A B管：50μl Buffer B 10~100μg DNA 无菌水补足体系至500μl B管：25μl Buffer B 5～50μg DNA 无菌水补足体系至250μl B管：5μl Buffer B 1～10μg DNA 无菌水补足体系至50μl 用移液管混匀B管中溶液并将B管中溶液轻轻逐滴加入到A管中。用气泡法混匀转染混合物，这一步尽量在2分钟内完成，室温孵育30分钟。 将混合物逐滴加入到细胞中，轻轻摇晃培养皿使混合物均匀分布在细胞表面。 放置到潮湿37°C、5%CO2培养箱中培养过夜。 次日早上用新鲜培养基更换细胞培养液，于37℃ 5%CO2培养箱中继续培养24-48h。 检验转染效率（如荧光观察，蛋白质印迹等）。 百恩维生物科技有限公司 地址： 深圳市南山区朗山路19号源政创新大楼A栋403 邮政编码： 518057 ： + 86 - 755 - 座机电话号码 ： + 86 - 755 - 座机电话号码