p53与miRNA.docVIP

P53信号通路中另一个重要成员――miRNA 人们在最近几项研究中发现了一个保守的miRNA家族――miR-34家族。miR-34家族是p53直接的转录靶标。miR-34的激活可以诱导细胞周期停滞和细胞凋亡，这些都是p53的活性效应。此外，miR-34的缺失会减少p53介导的细胞死亡。上述发现再一次告诉我们：miRNA是肿瘤抑制网络中的核心角色之一，非编码RNA同样是肿瘤发生过程中的关键分子。 过去数十年里对p53的深入研究使我们了解到，p53在负责调节多种与癌症相关应激状态的生理应答的复杂分子网络中，处于核心地位[1,2]。直至最近几年，人们仍然认为，p53网络完全由蛋白质编码基因构成，这些基因包括上游启动p53活性的基因、下游介导p53效应的基因以及组成调节性反馈环的基因。 新近的几项研究中，人们发现了一种组成p53网络的“新面孔”――miR-34，它是一种miRNA。这是研究人员第一次发现在关键性的肿瘤抑制通路中，还存在蛋白质与非编码RNA的相互作用[3~7]。miRNA是一类介导特异靶向mRNA发生转录后沉默的小分子调节RNA。miR-34家族中在进化上相当保守的miRNA可以直接在p53诱导下对DNA损伤及肿瘤发生做出应答[3~7]。研究人员发现，异位表达的miR-34可以产生与p53相同的生物学效应，如诱导细胞生长停滞及细胞凋亡，miR-34则是通过减少促增殖基因及抗凋亡基因的表达来发挥上述作用的[3~7]。以上研究结果表明，miRNA――或者从更广泛的角度来讲――非编码RNA是癌基因及肿瘤抑制网络中的重要分子，这是通过最近的研究发现才认识到的。癌症中的miRNA 人们首次在线虫中发现miRNA，它们是小的非编码RNA，在幼虫发育的时间选择方面具有重要作用。随后，几乎在所有多细胞生物中都发现了大量miRNA。大部分动物miRNA具有相同的生成和作用机制（图 1）。通常在经过接连两次的加工处理后，形成由18～22个核苷酸组成的成熟的miRNA，这些miRNA是由其具有茎环结构的前体剪接而来[8,9]。然后，这些成熟的miRNA便会与RISC结合，从而介导特异mRNA靶标的转录后基因沉默[8,9]。miRNA主要通过不完全的碱基配对来识别靶标，其中miRNA 5′端的序列在靶向识别中具有关键作用，5′端的序列因此被命名为“seed”[10]。由于miRNA的靶标识别以不完全配对为基础，这种特性使得miRNA具有对多种基因表达进行调节的能力。也正是由于主导miRNA进行识别的seed序列在许多基因中都存在，使得单独分析基因序列难以深入研究生理性相关miRNA靶标之间的关系。 图 1 miRNA的生成及转录后沉默模式图 新生miRNA基因转录产物首先经过微处理器复合物处理后形成茎环结构的miRNA前体，之后在Dicer酶处理下形成成熟的miRNA双链结构，这种结构通常以不完全配对形式与靶标结合。miRNA双链中的一条链与RISC结合，通过不完全碱基配对识别靶标，并诱导转录后基因沉默。针对这样的调节模式，已经出现了若干机制：miRNA可以通过脱腺苷化阻遏翻译起始或降解靶标mRNA，又或者使靶标基因形成胞质中的P body。 miRNA的前体通常是RNA聚合酶II的作用产物。和蛋白质编码基因一样，miRNA也具有复杂的组织特异性表达的模式，而且对多种靶标具有不同的调节能力，从而可对许多生长发育过程中的关键步骤及生理功能进行调控[8,9]。由此，miRNA对许多生理过程会产生重要影响，如细胞增殖[11]、细胞凋亡、应激应答、干细胞分化潜能的维持以及新陈代谢等，而这些生理过程往往会在细胞发生恶性转化的过程中受到干扰。从miRNA的表达模式[12,13]、循环扩增以及肿瘤中miRNA基因的缺失[14,15]，都可以推断出miRNA与癌症之间的关联。已有研究人员利用小鼠模型和培养的肿瘤细胞对miRNA在肿瘤发生及发展中的功能予以了功能性证实。一些miRNA确实是癌基因和肿瘤抑制网络中的组成部分。miR-17-92聚体[16~18]、miR-372-373[19]及miR-155/BIC[20]都被认为是B细胞淋巴瘤和睾丸癌的促癌基因。另一方面，研究者发现许多CLL患者缺失miR-15-16[21]。 更重要的是，来自蛋白表达研究及功能研究的结果表明，let-7在多种癌症中具有强大的肿瘤抑制作用[22,23]，这可能与它对癌关键基因，如Ras和HMGA2的抑制功能有关。除了上述所提到的在肿瘤发生及发展过程中具有关键作用的一些miRNA之外，miRNA表达模式的完全改变是肿瘤细胞的共同特征[13,24]。通常而言，与发生分化了的细胞类型有关的miRNA在肿瘤细胞中的表达减少，而那些在早期发育及干细胞中便有所表达的miRNA却保留下来[24