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姓名：王伟艳 班级：22班 学号：2015111122 电泳技术：在外电场的作用下，带电颗粒，例如不处于等电状态的蛋白质分子，将向着与其电性相反的电极移动，这种现象称为电泳。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。PH、带电荷量、分子大小、分子形状影响蛋白质在电场移动的方向与速度。核酸(包括脱氧核糖核酸和核糖核酸) HYPERLINK /doc/6485604-6699311.html \t _blank 可降解成片段，还可进一步降解成核苷酸;蛋白质(包括酶和 HYPERLINK /doc/3762118-3952140.html \t _blank 同工酶)多肽和氨基酸等都具有可电离的 HYPERLINK /doc/6788078-7004687.html \t _blank 基团，基团在溶液中能吸收或者给出氢离子，从而成为电荷粒子;又由于电荷粒子的多少不等以及具有相同电荷的分子又有大有小，于是在不同的介质中，在 HYPERLINK /doc/1417893-1498831.html \t _blank 电场影响下，它们移动的速度也不相同了。人们利用这种特性，用 HYPERLINK /doc/2347105-2482076.html \t _blank 电泳的方法对上述物质进行定性及定量分析，或者将一定的混合物分离成各个组份以及作少量电泳制备。 电泳原理：简单的说是在阴阳两极有电泳涂料，在电压作用下，带电荷的涂料离子移动到阴极，并与阴极表面所产生的碱性物质作用形成不溶解物，沉积于工件表面。它包括四个过程: （1）电解(分解) 在阴极反应最初为电解反应，生成氢气及氢氧根离子OH ，此反应造成阴极面形成一高碱性边界层，当阳离子与氢氧根作用成为不溶于水的物质，涂膜沉积，方程式为:H2O→OH+H。 （2）电泳(迁移) 阳离子树脂及H+ 在电场作用下，向阴极移动，而阴离子向阳极移动过程。 （3）电沉积(析出) 在被涂工件表面，阳离子树脂与阴极表面碱性作用，中和而析出不沉积物，沉积于被涂工件上。 （4）电渗（脱水） 涂料固体与工件表面上的涂膜为半透明性的，具有多数毛细孔，水被从阴极涂膜中排渗出来，在电场作用下，引起涂膜脱水，而涂膜则吸附于工件表面，而完成整个电泳过程。 生物大分子如蛋白质，核酸， HYPERLINK /doc/3837514-4029563.html \t _blank 多糖等大多都有阳离子和阴离子基团，称为两性离子。常以颗粒分散在溶液中，它们的静电荷取决于介质的H+浓度或与其他大分子的相互作用。在 HYPERLINK /doc/1417893-1498831.html \t _blank 电场中，带电颗粒向阴极或阳极迁移，迁移的方向取决于它们带电的符号。 电泳的分类、方法、应用：目前所采用的电泳方法，大致可分为2类:自由界面电泳和区带电泳。区带电泳应用广泛，支持物有很多种，由此又衍生出区带电泳的不同分支，例如凝胶电泳、滤纸电泳、粉末电泳、薄膜电泳等。其中凝胶电泳最为常见，包括聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳。 移动界面电泳：是不含支持物的电泳。溶质在自由溶液中泳动，故也称自由电泳。 目前电泳的类型很多，但是它们都是在经典的自由电泳的基础上发展起来的。它是在U形管内使蛋白质溶液和缓冲液之间形成清晰的界面，在电场作用下，界面移动，达到物质的分离。界面移动电泳曾常是定量分析蛋白质混合物组分的有力工具。用于研究人血浆的蛋白质成分，得到很有意义的结果。对比正常的和病人的血浆蛋白的图谱有助于临床诊断。 适用于高分子的检测，但不易完全分离。 聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native)及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS)变性聚丙烯酰胺凝胶。在PAGE电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。聚丙烯酰胺凝胶电泳简称为PAGE，是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成，聚合过程由自由基催化完成。催化聚合的常用方法有两种:化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(APS)为催化剂，以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。在聚合过程中，TEMED催化过硫酸铵产生自由基，后者引发丙烯酰胺单体聚合，同时甲叉双丙烯酰胺与丙烯酰胺链间产生甲叉键交联，从而形成三维网状结构。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。样品的分离效果好，分辨率高，小分子移动速度快，最先洗下，被分离。 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开