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- 2017-10-03 发布于河南
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酸性磷酸酶的分离纯化和动力学分析 李 平 法 概 述 酶在物质代谢及调节中的重要意义; 常用的酶蛋白分离纯化方法; 酶类检测在临床生化检验中的意义; 酸性磷酸酶作用特性及动力学特点。 目 的 要 求 1. 巩固诊断酶学有关的理论与实验知识; 2. 掌握酶的分离纯化方法; 3. 掌握酸性磷酸酶(aicd phosphatase ACP)活性测定的原理、方法和影响因素; 4. 熟悉酶活性测定的条件选择和方法建立。 * * 临床生物化学教研室 试剂与器材 一、ACP的分离纯化试剂:见实验教材P31; 二、ACP动力学分析试剂:见实验教材P35; 三、器材:普通离心机,721分光光度计,恒温水浴箱,研钵等。 实 验 内 容 一、 ACP的分离纯化 二、 ACP的比活性分析 三、 ACP的动力学分析 1. 时间进程(t-V )曲线 2. 酶浓度-速度([E]-V)曲线 3. pH-酶活性 (pH-V)曲线 4.底物浓度-速度([S]-V)曲线 5.抑制剂-速度([I]-V)曲线 一、 ACP的分离纯化 1.概况: ACP分布广泛 分子量100kD
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