马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术.docVIP

马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术研究 摘　要：以下寨65和青薯168为实验对象，采用不同培养基，对马铃薯两个品种进行脱毒及组培，对培养基及关键技术措施进行了分析，结果表明：与青薯168在不同培养中生长表现不同，下寨65茎尖组织在ms中加入ba2 mg/l的培养基中生长表现突出，而青薯168茎尖组织在ms中加入ba2 mg/l的培养基中成苗率较高。在同等条件下，加入iaa 0.50 mg/l的培养基宜用于下寨65脱毒苗的组织快繁，加入iaa 0.30 mg/l的培养基宜用于青薯168脱毒苗的组织快繁。 关键词：马铃薯；茎尖脱毒；组织快繁 我国是马铃薯生产第一大国，2008年种植面积达到573.33万hm2，鲜薯总产达8 800万t，平均单产约15.45t／hm2，总产位居世界第一[1]。马铃薯是无性繁殖作物，体内病毒的积累可使品种种性退化、品质和产量降低，对其生产造成严重危害[2]。因为大部分病毒不能感染马铃薯茎尖组织，通过茎尖脱毒，生产脱毒种薯用于生产是防止马铃薯退化的切实可行的措施[3]。马铃薯脱毒及组培快繁中所用基质和培养条件等关键技术方面的报道较多，但对下寨65和青薯168报道较少，本文既通过对马铃薯下寨65和青薯168两个品种进行脱毒及组培试验研究，为西部高原地区当家品种脱毒种薯的工厂化生产提供帮助。 1　材料和方法 1.1　供试材料 采用当家品种下寨65和青薯168。 1.2　试验方法 1.2.1　催芽　于11月中旬左右，挑拣表皮光滑、正常薯形、大小均匀、无病害和无损伤薯块，放置在有供暖的房间，室内温度24 ℃左右进行催芽。在催芽前薯块正处于休眠期，采用0.05～0.l0 mg/l的ga3来处理薯块，浸没于ga3溶液中10～20 min，以打破休眠[4]。 1.2.2　种薯处理　采用ms培养基，加入不同配比的激素，准备ba、naa、ga3、iba和iaa，由于激素在培养基中用量非常少，且不易溶于水，所以采用特殊的配置方法，配置成500 mg/l的溶液待用。当两个品种的种薯芽长到2～3 cm时，挑选生长健壮的芽，用清水冲洗芽部表面污物，在无菌操作室采用12种不同的方法进行表面消毒，用最近制作的蒸馏水冲洗四五次，将表面消毒剂彻底清除，不同表面消毒剂处理时间见表1。 1.2.3　茎尖组织培养　在解剖镜下剥取大小为0.30～ 0.50 mm茎尖生长点，置于不同浓度生长调节剂的ms培养基上进行培养，培养基编号为ms1～ms12，另设不加任何生长调节剂的ms培养基作为对照（ck），植物生长调节剂配比见表2。 1.2.4　马铃薯脱毒苗培养　在无菌条件下，将得到的无毒苗进行切段，每段带一叶，置于不同种类、浓度的1/2ms培养基中进行培养，以不加任何生长调节剂的1/2ms培养基作为对照，编号为m1～m9，快繁培养基配比见表3。 2　结果与分析 2.1　不同表面消毒方法对茎尖成活率和污染的影响 从表4可以看出，在茎尖组织培养过程中，外植体在清水冲洗后，直接采用0.1 %升汞或5 %次氯酸钠消毒，都可以将污染控制在5 %以下，但需时稍长，不同程度地影响到成活率。另外由于升汞的渗透性强，不宜彻底清洗，且对环境污染严重，建议尽量不要使用。 2.2　不同生长调节剂培养基配比对茎尖组织生长的影响 从表5可以看出，不含生物调节剂的培养基，马铃薯茎尖组织的生长非常缓慢，导致成苗率低下。在同等条件下，kt和6-ba对马铃薯茎尖组织的生长都具有促进作用，且效果显著，就这两种物质而言，含有kt的培养基中成苗率较低。在同等条件下加入ga3，可明显促进马铃薯茎尖组织分化，加快生长，提高成苗率。 2.3　不同生长调节剂配比对马铃薯脱毒苗快繁的影响 经过观测表明，与对照培养基相比较，培养基中加入生长调节剂后，芽萌发推迟，有效促进幼根生长。生长调节剂浓度过大时，愈伤组织发达，生根受到抑制。在实验中观察到下寨65对naa较为敏感，浓度稍大就会产生较大愈伤组织，生根较为缓慢，而青薯168反应较为迟钝，结果见表6。 3　结论 通过实验发现，在马铃薯脱毒技术实施过程中，采用酒精与其他两种表面消毒剂配合使用效果最好，能有效控制污染，降低对茎尖组织的影响。剥离的茎尖组织诱导成苗是脱毒快繁的关键技术，在实验中，kt和ba均有助于茎尖组织分化成苗。在快繁中，适当浓度的生物调节剂对马铃薯茎段生根有促进作用，但当浓度过高时只产生分生组织，不利于小苗生根，而且各品种表现有所不同。 参考文献： [1]戴亨仁，吴建军，韦禄春，等.江西红壤区马铃薯高产、高效、优质综合栽培技术[j].江西农业学报，2010， 2 ：74-76. [2]冉毅东，王蒂，戴朝曦.用组培法诱导试管微型薯的研究［j］.马铃薯杂志，1991，5（4）：193-199. [3]王炳君．马铃薯茎尖脱毒与微型薯生产[m]．北京：高等