细胞生物学-细胞膜与细胞表面.pptVIP

* 实际上,并不是所有的膜蛋白都象在人鼠融合细胞质膜上那样自由运动,在极性的细胞中,质膜蛋白被细胞骨架限定在细胞表面的某个区域, 细胞骨架不但影响膜蛋白的运动，也影响其周围的膜脂的流动。 * * 所有的膜蛋白。 * 膜蛋白的分离 膜蛋白的分离 去垢剂 是一端亲水一端疏水的双亲媒性分子， 它们具有极性端和非极性的碳氢链。当它们与膜蛋白作用时，可以用非极性端同蛋白质的疏水区作用，取代膜脂，极性端指向水中， 形成溶于水的去垢剂-膜蛋白复合物， 从而使膜蛋白在水中溶解、变性、沉淀 十二烷基磺酸钠(SDS)是常用的离子型去垢剂，它不仅可使细胞膜崩溃，并与膜蛋白的疏水部分结合使其分离，而且还破坏膜蛋白内部的非共价键，使蛋白变性，所以不宜用于分离有功能的膜蛋白。 Triton X-100是温和性去垢剂，它可以使膜脂溶解，又不使蛋白变性，可分离到有生物功能的膜蛋白。 去垢剂可分为离子型和非离子型两种。 1 膜脂的运动 ■ 沿膜平面的侧向运动 ■ 脂分子围绕轴心的自旋运动； ■ 脂分子尾部的摆动； ■ 双层脂分子之间的翻转运动 四、质膜的流动性 影响膜流动的因素 胆固醇：胆固醇的含量增加会降低膜的流动性。 脂肪酸链的饱和度：脂肪酸链所含双键越多越不饱和，使膜流动性增加。 脂肪酸链的链长：长链脂肪酸相变温度高，膜流动性降低。 其他因素：温度、酸碱度、离子强度等。 主要有侧向扩散和旋转扩散两种运动方式。旋转扩散指膜蛋白围绕与膜平面垂直的轴进行旋转运动。膜蛋白的侧向运动受细胞骨架的限制，破坏微丝的药物如细胞松弛素B能促进膜蛋白的侧向运动。 可用荧光标记技术和光脱色恢复技术检测膜蛋白的流动性。 2．膜蛋白的流动 Experiment demonstrating the mixing of plasma membrane proteins on mouse-human hybrid cells. The mouse and human proteins are initially confined to their own halves of the newly formed heterocaryon plasma membrane, but they intermix with time. The two antibodies used to visualize the proteins can be distinguished in a fluorescence microscope because fluorescein is green whereas rhodamine is red. (Based on observations of L.D. Frye and M. Edidin, J. Cell Sci. 7:319-335) 细胞融合技术:人、鼠细胞融合实验观察蛋白质运动 光脱色恢复技术（FRAP） 可以研究膜蛋白也可以研究膜脂的流动性。 光脱色恢复技术（FRAP） 淋巴细胞的成斑和成帽反应 如果小鼠细胞质膜中的抗体蛋白不能自由的进行侧向扩散的话,斑和帽都是不能形成的。 膜蛋白的运动性的制约因素 A 、 self-assemble into large aggregates B、 interactions with assemblies of macromolecules outside C:or inside the cell they can interact with D:proteins on the surface of another cell Diagram of an epithelial cell showing how a plasma membrane protein is restricted to a particular domain of the membrane. Protein A (in the apical membrane) and protein B (in the basal and lateral membranes) can diffuse laterally in their own domains but are prevented from entering the other domain, at least partly by the specialized cell junction called a tight junction. Lipid molecules in the outer (noncytoplasmic) monolayer of the plasma membrane are likewise unable t