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维生素C负荷试验
维生素C负荷试验
摘要:负荷试验是评定人体水溶性维生素营养水平方法之一。其方法是先给被测者大剂量维生素,然后测定一定时间内尿中该维生素排出量。若被测者体内有充足的该维生素储备,大剂量摄入后则将从尿中大量排出,反之,被测者的该维生素营养状况较差,因而组织中储备贫乏,摄入大剂量后组织将大部分或全部储留,则尿中排出量减少。 进行维生素C负荷试验时,被测者空腹,排尿后服维生素C500mg,饮水量可视季节而定,收集服用药后四小时尿。在尿瓶中应先加入1克草酸,使尿液pH保持在3-5,维生素C稳定而不被破坏。还原型维生素C其强还原性可还原染料2,6-二氯酚靛酚,该染料在酸性溶液中呈红色,被还原后失去红色,其溶液中过量,滴一滴染料时呈红色。在无杂质干扰时,被测溶液中维生素C还原的染料量与维生素C浓度成正比。
关键词:维生素C、尿液、负荷量
材料与方法
1.1实验材料与设备
1.1.1实验材料及试剂
1.1.1.1实验材料
维生素C、220ml尿液 W
1.1.1.2实验试剂:
1 1%草酸
称取草酸10克,溶解于100ml蒸馏水中。
2 2,6-二氯酚靛酚溶液 称取NaHCO3 40.2mg,溶解于200ml沸水中,待冷,称取2,6-二氯酚靛酚染料50mg溶液于上述NaHCO3溶液中,冰箱内过夜,次日过滤在250ml容量瓶中,蒸馏水稀释至刻度,摇匀,置棕色瓶中,冷藏保存。 标定:取已标定过的维生素C溶液2ml及1%草酸溶液5ml于锥形瓶中。以待标定的染料滴定,呈淡红色,15秒内不退色为终点。
3 维生素C溶液
称取维生素C粉末20mg,以1%草酸稀释至100ml,冷藏保存。
标定:吸取以上维生素C溶液2ml于锥形瓶中,加入6% KI溶液0.5ml,1%淀粉溶液2滴,再以标准的0.0010N KIO3溶液滴定至终点淡兰色。
4 0. 1000N KIO3溶液:
精确称取干燥的KIO3 0.3567克,用蒸馏水稀释至100ml。
5 0.0010N KIO3溶液:
取上述溶液1ml,用水稀释至100ml,次溶液1ml相当于维生素C 0.088mg。
6 1%淀粉溶液:
称取可溶性淀粉0.5mg,加水一滴,搅拌成糊状倒入50ml沸水中,混匀。冷藏待用。
7 KI 溶液:
称取KI 0.6g,溶解于10ml水中,临用时配置。
1.1.2实验仪器及设备
烧杯、容量瓶、锥形瓶、酸式滴定管、刻度吸管、量筒
实验方法步骤
留尿,在留尿样前在烧杯中先放入0.2-0.3g草酸。
保留约50ml尿样在小烧杯中,其余弃入厕所。
取2ml尿样,以10%草酸稀释至15ml,用2,6-二氯酚靛酚滴定,至出现淡红色15秒内部褪色为终点,记录染料用量。
2 实验数据记录与处理
2.1 实验结果 表2-1 实验结果记录表
项目 实验结果 尿液量(ml) 220 消耗0.0010N KIO3溶液的量(ml) 3.12 标定维生素消耗染料ml数 3.56 标定尿液消耗染料ml数 0.79
2.2 数据处理
2.2.1 维生素C浓度
维生素C浓度(mg/ml))))
3
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