酶工程02酶的生产要点.pptVIP

（1）间歇发酵 先在适于菌体生长的条件下进行培养，然后再转入适于产酶的条件下进行发酵，可以将菌体的生长条件区别对待，并根据各阶段的特点提供相应的最适条件，所以产酶率高，同时营养物质和诱导物质浪费很少。 平板培养的要点 单细胞悬浮液的制备：将要培养的材料诱导形成愈伤组织，再把它或器官组织用酶法或机械振荡培养法游离出单细胞，然后用适当大小孔径的不锈镍网过滤，除去残渣和多细胞团块，滤液即为细胞悬浮液。 悬浮细胞密度的调制：首先利用血球计数板法记数每ml悬浮液中的细胞数。然后调制细胞密度，一般的平板培养要求细胞密度为103~105个/ml 琼脂培养基的配制： 一是直接配制1.4%琼脂培养基 二是配制条件培养基，其配制方法：首先把已进行一段时期亲本细胞培养的液体培养基，离心沉淀细胞材料，取上清夜一份同灭菌的1.4%琼脂培养基一份趁热充分混匀，即为0.7%琼脂条件培养基。 平板的制备：取已知细胞密度的单细胞悬浮液1份，与熔化状态（35℃)的0.7%琼脂培养基2~4份充分混匀，倒入各个灭菌的培养皿中，制成3mm厚的琼脂培养基平板，盖上皿盖后密封。 培养：将平板置约26 ℃和黑暗下培养。 植板率：用来反映植板效率的高低，其含义是已形成细胞团的单细胞与接种总细胞数的百分数。 微室培养法 微室培养法是在无菌小室中培养接有单细胞的培养液小滴，使细胞得以生长和繁殖成单细胞无性系的无菌培养方法。它是为