华中农业大学本科毕业论文(设计)开题报告书(张悦).docVIP

华中农业大学本科毕业论文（设计）开题报告书 题 目 土壤含水量对白菜根肿发病的影响 姓 名 张悦 学 号 座机电话号码00917 专 业 植物保护 指导教师 侯明生 职 称 教授 学 位 农学学士 课题来源 农业公益性行业专项十字花科跟肿病 科学依据（包括课题的科学意义；国内外研究概况、水平和发展趋势；应用前景等） 白菜原产地为地中海沿岸和中国。长江以南为主要产区，种植面积占秋、冬、春菜播种面积的40%-60%。20世纪70年代后，中国北方栽培面积也迅速扩大，各地普遍栽培。其栽培面积和消费量在中国居各类蔬菜之首。 白菜以柔嫩的叶球、莲座叶或花茎供食用，可炒食、作汤、腌渍，与小白菜一起成为我国居民餐桌上必不可少的一道美蔬。在我国北方的冬季，大白菜更是餐桌上的常客，故有“冬日白菜美如笋”之说。大白菜具有较高的营养价值，故有“百菜不如白菜”的说法。大白菜根肿病是一种土传真菌病害。它是由鞭毛菌亚门芸苔根肿菌（plasmodiophoa??brassicae??woron）侵染十字花科植物的根，并使其发生病变而造成的一种病害。病菌以休眠孢子囊在土壤中越冬或越夏。在适宜条件下，休眠孢子囊萌发生成的游动孢子侵入寄主幼根、根毛，发育成变形体，最后变形体进入根部皮层组织和形成层细胞内，剌激其分裂和增大，9-10天即可形成根肿块，俗称大根病。（福建称菜癌，东北地区称菜瘤子）根肿块大的象马铃薯，小的象豆根瘤，有的象手指条状不规则地生长。病害发生后直接妨碍营养成分向植株地上部分输送，蔬菜长到中期，严重的在前期就出现根部腐烂，造成成片的蔬菜大面积死亡，给农民经济带来巨大损失,使PCR 技术在根肿病菌检测上得到了广泛应用。Hee Youn 1998 年 和S.ITO 1999 年 相继报道了利用PCR 进行DNA 扩增,对根肿病病原体进行特异性检测,并提出了从土壤中直接提取根肿病菌的方法。试验证明单管巢式PCR 和两轮PCR是检测田间土壤中根肿病菌孢子的有效方法。 参考文献 1. 梁谊,张爱芳,王文相,汤天寿. 十字花科蔬菜根肿病研究现状. 安徽农业科学,2001 ,29 6 :746 - 749 2. 王靖,黄云,李小兰,黎怀忠. 十字花科根肿病研究进展.植物保护20ll，37 6 ：153—158 研究内容 探讨十字花科蔬菜根肿病发生与土壤含水量的相关性。 土壤含水量对白菜根肿病发生的影响试验研究。 拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析 取无根肿病菌的草炭土（即灭菌培养土），过筛压碎晒干，在烘箱内烘烤72h左右直至烘干取出备用。为保证土壤含水量，实验前用塑料膜堵住孔口，称取经烘烤的土样130g 盛入塑料盆中，表面平铺20g晒干的菌土，播入易感病品种，逐一将土壤含水量调整为20 %、30 %、40 %、50%、60 %、70 %、80 %，共8个处理，3个重复，每一个重复为≥20株苗，其加水量分别为30g、45g、60g、75g、90g、105g、120g，置于温室培养。每隔1d 称重，补水保持各处理的土壤含水量，同时保证其它环境条件的一致性（图1）。PCR定性检测发芽当天和发芽后1-8d的侵染情况，定期取根并用苯酚苯胺蓝溶液染色观察根毛侵染情况，播种后第35天观察病情指数。 μlPCR产物，在TAE缓冲液中用1.0%琼脂糖凝胶电泳，120V恒压下电泳约30min，至指示剂快到到凝胶板底部处停止电泳，经溴化乙锭（EB）染色后在紫外投射仪上进行观察。根肿菌PCR条带处于500bp-750bp之间。 研究计划及预期成果 具体进度安排： 2013年3月，查阅与本课题相关的国内外文献，明确课题研究内容的国内外进展； 2013年5月，进行试验材料实验室栽培及养护，通过设置不同实验组进行接种试验及检测。 2013年5月下旬，进行数据分析统计及相关结论分析。 预期成果： 针对不同含水量下白菜跟肿病的侵染程度研究，分析不同含水量下病菌侵染的难易程度： 针对病菌侵染的难易程度分析，得出有效可行的防治根种病方法假设。 指导教师意见 指导教师签名： 年 月 日