小鼠骨髓细胞微核试验分析.pptVIP

小鼠骨髓细胞微核试验 一、实验目的 1． 观察诱变物质产生的微核； 2． 了解微核测定的方法与意义，计算微核率。 二、实验原理 微核（Micronuclei）是真核类生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生的。在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3 以下。 已经证实微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点和染色体畸变一样。所以，可用间期的微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。 目前国内外不少部门已经把微核测试用于辐射损伤，辐射防护，化学诱变剂，新药实验，染色体遗传疾病及癌症前期诊断等各方面。 三、实验材料 小鼠骨髓 四、实验步骤 1. 实验前6小时用对苯二酚80mg/kg注射于小鼠腹腔内，处死动物，用0.85%的生理盐水吹出股骨骨髓，离心1000转/分5分钟，除上清液，滴入少量小牛血清混匀后涂片。 2. 固定：放入甲醇和冰醋酸固定液中固定5-10分钟； 3. 染色：直接在Gimsa染液中染色10分钟，然后冲洗； 用滤纸擦干载片背面的水分，再用滤纸轻轻吸干载片上面的水分，取出盖上盖片； 4. 观察：嗜多染红细胞呈灰兰色，成熟红细胞呈桔红色，每只动物计数1000-2000个嗜多染红细胞，微核率为千分之2.58+0.41。 五、作业 1. 观察并记数细胞微核率； 2. 用统计学软件SPSS统计结果