第18章氨基酸、蛋白质和核酸剖析.ppt

18.4 核酸 构成核酸的戊糖 核成核酸的戊糖有两类： 核糖和脱氧核糖，对应的核酸称为核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（DNA）。 构成的核酸的杂环碱 嘌呤： 核糖核酸和脱氧核糖核酸的区别 核糖核酸（RNA）含有的戊糖是核糖，含有的杂环碱有腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和胸腺嘧啶 脱氧核糖核酸（DNA）含有的戊糖是2-脱氧核糖，含有的杂环碱有腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶 核苷 戊糖与杂环碱形成的苷叫核苷，RNA的四种核苷是： DNA的四种核苷 核苷酸 核苷中糖的5′（核酸中糖的碳原子的位次以1′ ，2′ ，3′ …表示）羟基，与磷酸形成的酯，叫做核苷酸。如： DNA的双螺旋结构示意图 核酸的功能 核酸具有极其重要的生理功能，是遗传生物遗传的物质基础。 DNA：主要存在于细胞核中，是遗传信息的携带者，DNA的结构决定生物合成蛋白质的特定结构，并保证把这种特性遗传给下一代。 RNA：主要存在于细胞质中，它们是以DNA为模板形成的，并且直接参加蛋白质的生物合成过程 存在于DNA分子上的遗传信息由DNA传递给RNA，再传递给蛋白质，通过DNA的复制，遗传信息一代代传下去。 嘌呤碱和嘧啶碱两两成对： 腺嘌呤（A）—— 胸腺嘧啶（T） 鸟嘌呤（G）—— 胞嘧啶（C） 双螺旋体一般不单独存在，而是与蛋白质以更复杂的形式结合，形成具有各种生理活性的核蛋白。 腺嘌呤—胸腺嘧啶键 A —T 鸟嘌呤—胞嘧啶键 G —C * 可根据放出氮气的体积用于氨基酸的定量分析。该方法叫做（Vanslyke）氨基测定法。 3．与亚硝酸的反应 蛋白质腐败时，由精氨酸或鸟氨酸可以产生腐胺(putrescine) H2N-(CH2)4-NH2，由赖氨酸脱羧可得到尸胺（cadaverine）H2N-(CH2)5-NH2。人体内的胺类也是氨基酸经脱羧后产生的。 4．脱羧反应 5.与2，4-二硝基氟苯反应 在室温和弱碱条件下，氨基酸中氨基上的氢原子 可与2，4-二硝基氟苯反应（DNFB）发生亲核取代。 DNP氨基酸呈黄色，可用于氨基酸的鉴定。 定义——氨基酸残基之间通过肽链相连的化合物。 结构：肽键（peptide bond） 18.2 多肽（peptide） 酰胺键 一、肽的结构与命名 有三个氨基酸残基，是三肽（tripeptide） 末端结构：N-末端——有—NH3+的一端 C-末端——有—COO-的一端 氨基酸残基（amino acid residue）：肽链中每一个氨基酸单位。 一、肽的结构与命名 多肽结构通式： 肽分子中的酰胺键的双键特征 一、肽的结构与命名 Cα C N Cα O H 肽键的结构 0.132nm 具有双键性质，不能自由旋转 6个原子都在同一平面上，两个α-碳处于反式，O和H原子处于反式。 一、肽的结构与命名 肽链的旋转受阻，多肽主链构象是有限的，一般以反式构型存在。 C C C C O N N H R H C O H φ ψ C N N O C H C R H C O H C ψ φ 一、肽的结构与命名 酰胺键的平面关系 肽单元的空间结构特征： 1．肽单元是平面结构，组成肽单元的六个原子共平面。 2．肽键具有部分双键性质，使C-N之间的旋转受到一定 阻碍。 3．肽键一般呈反式构型。 一、肽的结构与命名 名称：丙氨酰半胱氨酰亮氨酸 缩写：丙—半胱—亮或Ala—Cys—Leu 简写：A—C—L 命名： 以C-末端的氨基酸为母体，其它的氨残基称某氨酰，依次命名。如： 一、肽的结构与命名 为了确定肽的结构，通常必须进行如下测定： ①组成肽的氨基酸的种类； ②每种氨基酸的数目； ③这些氨基酸在肽链中的排列顺序。 1. 氨基酸组成和含量分析 二、多肽结构测定和端基分析 2. 氨基酸顺序的测定 A．部分水解法： B．端基分析法： 用特殊试验鉴定肽链的C-端或N-端。 端基分析有酶解法和化学法。 二、多肽结构测定和端基分析 酶解法： 用羧肽酶处理多肽，水解只发生在C-端；用氨肽酶处理多肽，水解只发生在N-端； 例如，某三肽结构的测定： 因此，原三肽是：半胱·赖·色肽 2. 氨基酸顺序的测定 二、多肽结构测定和端基分析 化学法： 利用某些有效的化学试剂，与多肽中的游离氨基或游离羧基发生反应，然后将反应产物水解，其中与试剂结合的氨基酸容易与其它部分分离和鉴定。 例如： 2. 氨基酸顺序的测定 二、肽结构测定和端基分析 (1) N-端分析 A、2,4-二硝基氟苯（DNFB）法 B、丹磺酰氯（DNS-Cl）法 灵敏度比 上法高百倍 此法称为Edman降解法，其原理已被现代氨基酸自动分析仪所采用。 (1) N-端分析 C、