产青霉素酶菌种的分离剖析.pptVIP

产青霉素酶菌种的分离、纯化及活性测定 目录 实验原理 实验内容 实验结果 讨论 实验原理 青霉素酶又称β-内酰胺酶(β-lactamase,EC3.5.2.6),可水解β-内酰胺类抗生素。利用青霉素酶具有水解β-内酰胺类抗生素的特点, 可将其用于抗菌药物筛选。 枯草芽孢杆菌是常见的青霉素酶分泌菌种，革兰氏阳性菌，属芽孢杆菌。无荚膜，周生鞭毛，能运动；芽孢呈椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。 实验原理 紫外线作为物理诱变因子对诱变最有效的波长是在253-265 nm。紫外线诱变的主要生物学效应是由于DNA 变化而造成的，DNA 对紫外线有强烈的吸收作用，尤其是碱基中的嘧啶，它比嘌呤更为敏感。 在进行酶活力诱导时，采用剩余碘量法测定，以标准对照法计算含量。青霉素在碱性条件下水解，生成的青霉噻唑酸在酸性条件下与定量过量的碘作用，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定，同时做空白试验。 实验内容 实验内容 实验内容 实验内容 3、精密量取青霉素溶液50ml,置100ml量瓶中，预热至37℃后，精密加入已预热的青霉素酶稀释液25ml，迅速混匀，在37℃准确放置1小时，精密量取3ml，立即加至已精密量取的碘滴定液(0.01mol/L) 25ml中,在室温暗处放置15分钟，用硫代硫酸钠滴定液(0.01mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉