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实验2 相差显微镜和荧光显微 镜的使用及细胞器的观察 一、实验目的 2.掌握两种显微镜的原理、结构及使用方法。 二、实验原理 1.相差显微镜的工作原理 是通过环状光阑和相差板，利用光的衍射与干涉现象把肉眼难以分辨的相位差变为振幅差即明暗差。相差方法能对透明的活体进行直接观察，无需采用使细胞致死的固定和染色的方法。染色给活体以有害的影响，甚至失真。 二、实验原理 2.荧光显微镜的工作原理 就是利用一些特殊的装置，产生短波长的激发光，照射在样品上，从而激发细胞内的荧光物质或荧光染料发出长波长的可见光即荧光，结果在视野中形成荧光映像。 二、实验原理 ⑴自发荧光：细胞内天然物质经短波长的激发光照射后直接发出荧光的现象。 例如：叶绿体含有叶绿素发出红色荧光；细胞壁含有木质素发出黄色荧光。 二、实验原理 ⑵诱发荧光：有些生物材料或细胞组分自身不能发出荧光，但是与荧光物质结合后，激发后呈现一定颜色的荧光现象。 例如：经0.01%吖啶橙染色后，DNA发出绿色荧光，RNA发出淡红色荧光。 三、实验用品 三、实验用品 四、实验方法 四、实验方法 四、实验方法 四、实验方法 四、实验方法 四、实验方法 四、实验方法 四、实验方法 四、实验方法 四、实验方法 四、实验方法 四、实验方法 四、实验方法 五、注意事项 1.使用相差显微镜时，载玻片和盖玻片应清洁无痕，载玻片的厚薄要均匀，厚度在1mm