《仪器分析》第四章_分子发光光谱法.pptVIP

对于很稀的溶液，即?bc ? 0.05，此时上面的式子中第二项以后的各项可以忽略不计，即 1－e-2.303?bc＝ 2.303?bc If＝ ? ?Ia＝ ? ? I0 ? 2.303?bc 因此，当激发光强度一定，并且溶液浓度较小时，荧光强度与荧光物质浓度之间成正比： If ＝Kc 对于较浓的溶液，其吸光度大于0.05时，荧光强度与浓度的线性关系将出现偏离。 单组分直接测定 单组分间接测定 化学反应转化为荧光分子 荧光猝灭法 多组分的荧光测定 荧光峰不重叠，选不同的发射波长；激发光谱明显不同，荧光峰重叠，可选用不同的激发波长 无机物分析：无机阳离子本身不发荧光，可与一些有机试剂形成荧光配合物，可以测定的元素已达60多种 溶液单分子行为研究：罗丹明6G标记DNA 基因研究与检测：DNA与小分子的相互作用等 生物化学和生理医学：能测定微量氨基酸和蛋白质，还能研究蛋白质的结构，酶以及酶动力学和机理，细胞新陈代谢等 药物分析：分析低浓度的药物，6－巯基嘌呤是急性白血病的重要药剂，相关分析方法还较少。用高锰酸钾将6－巯基嘌呤氧化形成嘌呤－6－磺酸盐，即可用荧光法进行测定 4 磷光光谱法 激发单重态与激发三重态振动能级重叠时，发生系间跨越，从激发单重态转到能量较低的三重态，迅速振动驰豫到三重态最低振动能级，在10-4秒至几秒内发射磷光回到基态。 磷光和荧光都是光致发光