第六章 离子交换层析技术.ppt

离子交换树脂的命名方式： 离子交换产品的型号以三位阿拉伯数字组成，第一位数字代表产品的分类，第二位数字代表骨架的差异，第三位数字为顺序号用以区别基因、交联剂等的差异。 表8-1 树脂型号中的一、二位数字的意义 代号：　0 1 2 3 4 5 6 分类名称： 强酸性 弱酸性 强碱性 弱碱性 螫合性 两性-氧化还原性 骨架名称： 苯乙烯系 丙烯酸系 醋酸系 环氧系 乙烯吡啶系 脲醛系 氯乙烯系 大孔树脂在型号前加“D”，凝胶型树脂的交联度值可在型号后用“×”号连接阿拉伯数字表示。如D011×7，表示大孔强酸性丙烯酸系阳离子交换树脂，其交联度为7。 国外一些产品用字母C代表阳离子树脂（C为cation的第一个字母），A代表阴离子树脂（A为Anion的第一个字母），如Amberlite的IRC和IRA分别为阳树脂和阴树脂，亦分别代表阳树脂和阴树脂。 四、离子交换层析的注意事项 五、离子交换层析中常见问题的分析 离子交换层析分离链霉素 p142 离子交换层析分离庆大霉素 ? 五、偶极离子排斥作用： 偶极离子 RSO3-Na+ + H3+NRCOO - RSO3- H3+ NRCOO - +Na+ RSO3- H + + H3+NRCOO - RSO3- H3+ NRCOO H 钠盐树脂 氢型树脂 与钠型树脂相比，氢型树脂有较大的有效交换容量。 * 氢型与钠型磺酸基树脂吸附氨基酸比较 * 第六节 离子交换的操作 一、?树脂的选择 p129 目的物是弱酸性或弱碱性的小分子物质时，宜选用强酸强碱树脂（氨基酸的分离）。 蛋白质、酶和其它生物大分子的分离多采用弱碱或弱酸性树脂，减少生物大分子的变性，利于洗脱，提高选择性。 * ? 二、树脂的处理和再生 p130 1、? 外观特征 透明或半透明；颗粒圆整，粒度均匀，强度。 2、? 树脂的预处理 （1）??? 物理处理：去杂，过筛。 （2） 化学处理：用8～10倍的1mol/L 盐酸或氢氧化钠溶液交替浸泡。 * 氨基酸分离前树脂的处理 * 不同类型树脂的处理 * 树脂的再生 树脂再生：使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程。 再生过程： （1）?去杂，大量水冲洗，除去物理吸附的杂质。 （2）?用酸、碱处理除去与功能基团结合的杂质。 3 转型： * 三、加样与洗脱 交换：静态交换 动态交换 洗脱： 洗脱方式：分静态洗脱及动态洗脱两种，pH及离子强度改变。 洗脱液：酸、碱、盐。 * 酸、碱洗脱液旨在改变吸附物的电荷或改变树脂吸附基团的解离状态，以消除静电结合力，迫使目的物被释放出来； 盐类洗脱液是通过高浓度的同种电荷的离子与目的物竞争树脂上的活性基团，使吸附物解离。 * 洗脱方式 动态洗脱： 1、 溶液pH及离子强度不变。 2、分阶段改变溶液pH及离子强度。 3、连续改变溶液pH及离子强度。 梯度洗脱：自动化的梯度仪 * 梯度洗脱 梯度混合器: ?A瓶为低浓度盐溶液 B瓶为高浓度盐溶液 C CA―（CA―CB）VAA/AB * 第七节 离子交换层析的应用 在制药工业中的应用 p136 分离纯化——氨基酸制备 无盐水制备 离子交换层析分离链霉素 p142 离子交换层析分离庆大霉素 * 第七节 应用实例 分离纯化——氨基酸制备 无盐水制备 * 氨基酸制备、分离 猪血粉水解制备6种氨基酸: * 无盐水制备 无盐水制备是利用氢型阳离子交换树脂和羟型阴离子交换树脂的组合以除去水中所有的离子，其反应式如下： * 无盐水制备 阳离子交换树脂用强酸性树脂，阴离子交换树脂可以用强碱或弱碱树脂。 强酸——弱碱 或 强酸——强碱； 当对水质要求高时，经过一次组合脱盐，还达不到要求，可采用两次组合: 强酸——弱碱——强酸——强碱； 强酸——强碱混合床。 * 混合床 混合床系将阳、阴两种树脂混合而成，脱盐效果好。 混合床中所发生的反应: * 混合床－无盐水 * 图8.20 混合床的操作 a 为水制备时的情形； b 为制备结束，用水逆流冲洗。阳、阴树脂根据比重不同分层，一般阳树脂较重在下面，阴树脂在上面； c 为上部、下部同时通入碱、酸再生，废液自中间排出； d 为再生结束，通入空气，将阳、阴树脂混合、准备制水 混合床－抗生素脱盐 经过第一柱（阳树脂）时，溶液变酸，而经过第二柱（阴树脂）时，溶液又变碱。 链霉素脱盐：强酸1×25和弱碱311×4树脂组成混合床，脱盐效果较好。 * 第八节 新型离子交换剂 一、大孔、均孔树脂 （一）大孔型离子交换树脂（macro porous ,MP） （二）均孔型离子交换树脂 IR 二