分析样品制备新技术—固相萃取.pptVIP

分析样品制备新技术—固相萃取 一、固相萃取技术概述 Solid-Phase Extraction，SPE 四、固相萃取的基本操作程序 （1）柱活化（Condition） 目的是除去吸附剂中可能存在的杂质和使填料溶剂化，以提高萃取的重现性。非极性柱活化溶剂为易溶于水的甲醇、乙腈、丙酮等，通常还要用水洗去残留在柱上的有机溶剂；极性柱可采用氯仿、苯、石油醚、乙醚等非极性溶剂处理。 （2）上样（Load Sample） 加试样于SPE柱上，用5~10倍柱床体积的溶剂清洗。在该步骤，分析物及杂质被保留在吸附剂上为防止分析物流失，试样溶剂强度不宜过高。 （3）淋洗杂质（Wash） 一般用中等强度的溶剂，将干扰组分洗脱下来。 （4）目标物洗脱（Elution） 加试样于SPE柱，用合适的溶剂淋洗，收集并分析流出液，得洗脱溶剂体积对分析物的洗脱曲线，确定合适的洗脱剂强度和体积。将分析物完全洗脱并以最小洗脱液体积收集。 五、固相萃取中的两个重要概念 1、吸附容量——单位质量吸附剂所能吸附有机物的总质量。现在使用的固相吸附剂大都有500μg/g以上的吸附容量。 2、穿透体积——上样后，SPE柱出口流出的样品溶液中能检测到目标物的上样体积。 一般意义上，在穿透体积以内，样品中待分析物均被SPE吸附；穿透体积以上，则样品中的待分析物部分被吸附，直至完全不被吸附。它是确定上样体积和衡量浓缩能力的重要参数！ 样品穿透体积的测算： 穿透体积可通过测定穿透曲线确定。先测定已知含量的痕量浓度标准溶液的紫外吸收强度（A0），然后用该溶液过柱，按一定体积间隔连续测定滤液的紫外吸收强度（A）；最后以滤液体积为横坐标，以紫外吸收强度比（A/A0）为纵坐标作图。当强度比为0.01时的滤液体积称为初始穿透体积，为0.99时的滤液体积被认为是最大穿透体积，即待检目标物全部流出。 穿透曲线测定的实例——西玛津、阿特拉津和利谷隆在C18柱上的穿透曲线测定： 用100μg/L的标准液测定了西玛津、阿特拉津和利谷隆三种农药在C18-SPE柱上的穿透曲线如下图所示。由图可以看出，穿透曲线是一条“S曲线” ，不同的农药曲线不同——穿透体积越大，曲线跨度越大。 小结与讨论： 1、SPE是取代“液液提取”的新技术，提取、净化、浓缩同步进行，与传统的液液萃取相比，不仅可以有效地将分析物与干扰组分分离，有效减化样品前处理程序，操作简单、省时省力，而且大大提高了分析物的回收率。 2、农药残留分析中固相萃取可以是持留农药在柱子中，用溶剂洗脱后进行分析；也可以是持留样品杂质，让农药通过，收集后用于分析。水样残留农药一般用前一种方式提取，而食品、动植物样品残留农药一般用第二种方式。 请多提宝贵意见和建议！ * 农药残留分析与检测 李 广 领 资源与环境学院 Field Sample Concentration Homogenate Extracted Laboratory sample 农药残留色谱分析样品的制备（以果蔬样品为例） Cleaning up Analytical Sample Sample preprocessing SPE是指液体样品中的分析物通过吸附作用，被保留在吸附剂上，然后用适当的溶剂洗脱的过程。 最早由Breiter于1976年提出，主要用于人体体液中药物残留提取，始称“柱提取”，后扩展至水样农药残留提取和净化，并称为“固相萃取”，目前越来越多地应用于液体样品中残留农药分析样品的制备。 二、固相萃取技术的基本原理 SPE可看作是一个液相色谱过程，吸附剂为固定相，洗脱溶剂为流动相，利用吸附剂对农药和杂质吸附能力的差异所产生的选择性保留，对样品进行提取和净化。这种保留可以通过改变吸附剂类型、洗脱剂类型、洗脱剂体积和离子强度等来满足分析需要。 三、固相萃取装置 SPE装置由SPE小柱、主机和辅件构成。SPE小柱包括柱管、烧结垫和吸附剂（柱床）三部分；SPE辅件一般有真空系统、大容量采样器和缓冲瓶。 注意：强溶剂能使分析物快速洗脱并以最小体积收集，但会有较多强保留性杂质。用弱溶剂洗脱时，所收集分析物组分体积可能较大，但含杂质较少。 穿透体积的实际指导意义： 例如：估计某水样中甲胺磷含量在0.05μg/mL以下，仪器检测限为25 ng，甲胺磷水溶液对360 mg C18柱的穿透体积为1.2 mL，可以知道，上样体积只能在1.2 mL以下，超过这个量就会有甲胺磷流失，而要达到检测限，0.5 mL的水样就足够了。 评估萃取中的问题 评估分析的要求 浓缩的要求 样品稀释、方法检测灵敏度 纯度的要求 检测方法、可能的干扰 溶剂的要求 检测方法接受的水溶性或非水溶性洗脱液 样品特性 分析物 分子量、官能团、极性、溶解性等 干扰物 分子量、官能团、极性、溶解性等 样品