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革兰氏染色法基本原理 2010-12-20 16:40　 【大 中 小】【我要纠错】 　革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色法不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。 　　革兰氏染色需用四种不同的溶液：碱性染料初染液；媒染剂；脱色剂和复染液。碱性染料初染液的作用象在细菌的单染色法基本原理中所述的那样，而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫。媒染剂的作用是增加染料和细胞之间的亲和性或附着力，即以某种方式帮助染料固定在细胞上，使不易脱落，碘（iodine）是常用的媒染剂。脱色剂是将被染色的细胞进行脱色，不同类型的细胞脱色反应不同，有的能被脱色，有的则不能，脱色剂常用95%的酒精（ethanol）。医学教.育网搜集整理复染液也是一种碱性染料，其颜色不同于初染液，复染的目的是使被脱色的细胞染上不同于初染液的颜色，而未被脱色的细胞仍然保持初染的颜色，从而将细胞区分成G+和G-两大类群，常用的复染液是番红。 /wlkj/HMU_Microbiol/index_Textbook_88_Test_01.html 二、名词解释 1L型细菌：是指在某情况下，（如受溶菌酶或青霉素作用），细菌细胞壁中肽聚糖结构可遭破坏，或其合成受到抑制，当菌细胞壁受损后细菌并不一定死亡而成为细胞壁缺陷的细菌，称L型细菌。 2．热原质：许多革兰阴性菌如伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌及一些革兰阳性菌如枯草芽胞杆菌，合成代谢过程中合成一种多糖，将其注入人体可引起发热反应。 3．BCG：是卡、介二氏把有毒的牛型结核杆菌在含有胆汁，马铃薯，甘油的培养基上长期人工培养，经13年，传230代，得到毒力减弱而抗原性稳定的菌株称卡介苗（BCG），用于结核病的预防。 4．转化：是指受体菌直接摄取供体菌的游离DNA片段，并正整合到自己的基因组中，从而获得新的遗传性状叫转化。 5．转导：是以温和噬菌体为媒介，将供体菌DNA片段转移到受体菌内，使受体菌获得新的遗传性状，称转导。 6．溶原性转换：是指细菌因染色体上整合有前噬菌体，从而获得新的遗传性状。如产气白喉杆菌的形成。 7．接合：是指两个细菌直接接触，供体菌通过性菌毛将DNA转入受体菌内，使受体菌获得新的遗传性状，称接合。如R质粒的转移。 8．噬菌体：是侵袭细菌（或螺旋体、真菌）的病毒，具有体积微小，无细胞结构，严格寄生性及分布广泛特性。 9．温和噬菌体：有些噬菌体感染细菌后不增殖，不裂解细菌，但其核酸整合到细菌染色体DNA上，成为细菌DNA的一部分，并能与细菌染色体一起复制，当细菌分裂时又能传至子代细菌的。这种噬菌体称为温和噬菌体。 10．前噬菌体：整合在细菌染色体上的噬菌体核酸称前噬菌体。 11．溶原性细菌：染色体上带有前噬菌体的细菌。并有4个特性。 12．侵袭力：是指绝大多数病原菌具有侵入并定位于某组织，适应机体生化环境进行增殖，并向其他部位扩散，抵抗机体的防御机能的性能。 13．细菌亚单位疫苗：是利用细菌表面结构的某种化学成分制成的疫苗如脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌表面的特异性多糖，经提纯后加入适当吸附剂，可制成多糖疫苗。 14．灭菌：指杀灭或去除物体上所有微生物的方法，包括抵抗力极强的细菌芽胞。 15．消毒：指杀死物体上病原微生物的方法，芽胞或非病原微生物可能仍存活。 1．? 2．? 1）荚膜：具有抗吞噬及抗消化作用，与致病力有关；（2）鞭毛：为细菌的运动器官，有抗原性；（3）菌毛：有黏附于多种细胞受体的作用，与致病力有关，有抗原性；（4）芽胞：对理化因素抵抗力强，可保护细菌耐受不良环境的影响。此外，还可根据这些特殊结构的有无及其特点，在实践中可用来鉴定细菌。灭菌时，芽胞是否被杀死可作为判定灭菌是否彻底的指标。 3．? 1）具有自我复制的能力；（2）质粒携带的基因往往赋予宿主细菌新的表型；（3）可在细菌间转移；（4）几种质粒可同时共存于同一细菌细胞内。较重要的质粒有R因子（致育因子、编码性菌毛）、Col因子（大肠菌素因子，控制大肠菌产生大肠菌素）。 4．请指出五种产生外毒素的细菌，及产生的外毒素类型