中国药典微生物验增修订内容及检查要点.doc

中国药典微生物检验增修订内容及检查要点 中国药典微生物检验有关内容及增修订情况 中国药典2010年版微生物检验有关内容 中国药典微生物检验增修订情况 与微生物检验有关的GMP检查要点 微生物检验的关键质量控制点 现行版GMP中与微生物检验有关的条款及检查关注点 中国药典微生物检验有关内容及增修订情况 中国药典2010年版微生物检验有关内容 无菌检查法 微生物限度检查法 灭菌法 新增了四个指导原则 抑菌剂效力检查法指导原则 药品微生物实验室规范指导原则 微生物限度检查法应用指导原则 药品微生物检验替代方法验证指导原则 无菌检查法 前言部分 培养基 灵敏度检查 稀释液、冲洗液等 方法验证 薄膜过滤法 培养及观察 结果判断 表1、表2和表3 前言部分 规定了防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出 规定了日常检验还需要对环境进行监控 对无菌检查的人员资质提出了要求 培养基 删除了硫乙醇酸盐流体培养基用于培养好氧菌、厌氧菌的规定 删除了改良马丁培养基用于培养真菌的规定 灵敏度检查 修订了黑曲霉的孢子悬液制备方法，规定应使用含0.05％（v/v）聚山梨酯80的0.9％无菌氯化钠溶液稀释 规定了稀释后的工作用菌液的保存条件和保存期限 “菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2～8℃，可在24小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在2～8℃，在验证过的贮存期内使用。” 稀释液、冲洗液等 规定可根据供试品的特性，选用其他经验证的适宜的溶液作为稀释液、冲洗液 方法验证 标准菌种的选择上，删除了铜绿假单胞菌，增订了大肠埃希菌 明确规定了薄膜过滤法验证时，应取每种培养基规定接种的供试品总量用于过滤 薄膜过滤法 增订了抗生素供试品应选择低吸附的滤器及滤膜的规定 对每片滤膜的总冲洗量进行了规定，不得过1000ml 修订了无菌气（喷）雾剂供试品的检验方法，规定冰室的温度应至少为-20℃ 对装有药物的注射器供试品的检验方法进行了详细的规定 培养及观察 对于培养14天后，不能从外观上判断有无微生物生长的情况，删除了可划线接种于斜面培养基上的规定，同时删除了可根据斜面是否有菌生长而判断的规定 结果判断 增订了阳性对照管和阴性对照管的实验结果对于整体实验结果判断的作用 “阳性对照管应生长良好，阴性对照管不得有菌生长。否则，试验无效。” 表1、表2和表3 表1 修订了表格第3列的名称。05版的名称为“每种培养基最少检验数量”，10版修订为“接种每种培养基所需的最少检验数量” 表2 修订了表格名称，明确了该表格用于确定液体制剂的最少检验量。05版的名称为“上市抽验样品（液体制剂）的最少检验量”，10版修订为“液体制剂最少检验量及上市抽验样品的最少检验数量”。 修订了注释项，对供试品容器装量不够接种两种培养基的情况，明确规定最少检验数量应加倍。第3列中规格小于1ml和大于500ml的供试品，对最少检验数量的确定方法也根据注释的修订作了相应的调整。 表3 修订了表格名称，明确了该表格用于确定固体制剂的最少检验量。05版的名称为“上市抽验样品（固体制剂）的最少检验量”，10版修订为“固体制剂最少检验量及上市抽验样品的最少检验数量”。 修订了注释项1，对供试品容器装量不够接种两种培养基的情况，明确规定最少检验数量应加倍。第3列中规格小于50mg的供试品和其他医疗器具，对最少检验数量的确定方法也根据注释的修订作了相应的调整。 微生物限度检查法 前言及检验量 供试液制备 计数培养基的适用性检查 计数实验的方法验证 计数实验的操作方法 控制菌检查的培养基适用性 控制菌检查的方法验证 控制菌检查的内容 标准体系 前言及检验量 规定了检验过程中防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出 前言中修订了控制菌检查的温度，规定与细菌计数实验温度相同，均为30～35℃ 前言中增订了对于特殊品种可以最小包装单位报告的规定 检验量中对要求进行沙门菌检查的供试品，明确了检验量应增加的数量，与05版比较，主要是说明了阳性对照的检验量 供试液制备 增订了贴剂供试品的制备方法 “取规定量供试品，去掉贴剂的保护层，放置在无菌玻璃或塑料片上，粘贴面朝上。用适宜的无菌多孔材料（如无菌纱布）覆盖贴剂的粘贴面以避免贴剂粘贴在一起。然后将其置于适宜体积并含有表面活性剂（如聚山梨酯80 或卵磷脂）的稀释剂中，用力振荡至少30 分钟，制成供试液。贴剂也可以其他适宜的方法 制备成供试液。” 修订了离心沉淀法，删除了高速离心的规定，并对该方法的使用范围进行了限定。500转/分钟，离心3分钟，仅用于细菌检查。 计数培养基的适用性检查 该部分内容均为新增 规定了该内容的应用范围：成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均