利用原核表达的外壳蛋白制备草莓轻型黄边病毒抗血清.docVIP

利用原核表达的外壳蛋白制备草莓轻型黄边病毒抗血清 　　摘 要：【目的】探索以原核表达的草莓轻型黄边病毒（SMYEV）外壳蛋白（CP）为抗原制备抗血清的方法，从而建立利用ELISA检测SMYEV的技术体系。【方法】利用IPTG诱导SMYEV CP重组蛋白在大肠杆菌中表达，分离纯化重组蛋白并以其为抗原对新西兰兔进行免疫。血清效价达到要求后，分离纯化抗血清并利用DAC-ELISA对草莓植株进行SMYEV检测，同时利用RT-PCR对DAC-ELISA检测结果进行验证。【结果】宿有SMYEV CP基因的大肠杆菌经IPTG诱导后出现一条52.0 ku左右的特异性重组蛋白谱带，以纯化的重组蛋白为抗原制备出专一性较强的针对SMYEV的抗血清，该抗血清稀释800倍后仍能有效检测草莓植株中的SMYEV。利用DAC-ELISA和RT-PCR对26份草莓试材分别进行SMYEV检测，2种检测方法的检测结果基本一致。【结论】以原核表达的SMYEV CP为抗原可以制备出专一性较强、效价较高的SMYEV的抗血清。 　　关键词： 草莓轻型黄边病毒（SMYEV）； CP； 原核表达； 抗血清； ELISA 　　中图分类号：S668.4 文献标志码：A 文章编号：1009-9980？穴2013？雪04-0578-04 　　草莓轻型黄边病毒（Strawberry mild yellow edge viru