第六章 化学检测 根据物质的化学性质而对物质进行定量、定性测定。 应用最早、最广泛的检测技术 简便、快速、操作容易 一 糖类的化学检测 糖类包括多糖、双糖、单糖 单糖和某些双糖具有游离羰基——还原糖 多糖和蔗糖等无还原性——非还原糖 糖类化学检测主要是利用游离羰基的还原性质,与试剂(氧化剂)进行氧化还原反应而进行测定的。 非还原糖必须转化为还原糖再进行测定 最常用的试剂:斐林(Fehling)试剂 基本组成:A:CuSO4溶液 B: NaOH和酒石酸钾钠溶液 使用时A、B等体积混合 生成酒石酸钾钠铜) 酒石酸钾钠铜是氧化剂,可与还原糖的游离羰基发生氧化还原反应,而进行糖的测定。 定糖常用方法 1 兰——爱农(Lane-Eynon)法 次甲基蓝(亚甲基蓝、四甲基蓝)法、置换法、直接滴定法 反应终点用次甲基蓝指示剂显示(还原糖滴定斐林试剂,由于次甲基蓝氧化能力比二价铜弱,待二价铜全部还原后,过量1D还原糖使次甲基蓝还原,蓝色消失) 多糖或其他非还原糖需转化为还原糖后再滴定 如淀粉,可用酸解或酶解 操作要点 (1 )斐林试剂的标定 (a)标定预备试验 A、B各5mL+10mL水(250mL三角瓶中)摇匀,加热至沸腾,+2D1%次甲基蓝溶液,用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失,耗标准葡萄糖液(0.1%或0.2%)V1mL。 (b)标定 A、B各5mL+10mL水(250mL三角瓶中)摇匀
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