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分光光度法測量溶液色素含量实验方案设计报告
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实验方案报告
实验课程: 电子科技专业实验
实验项目: 分光光度法测量溶液色素含量
班级: 学号: 姓名:
实验方案报告成绩: 教师签名:
实验类型 设计性 ? 综合设计性 ? 综合性 ? 验证性 ?
一、实验内容
使用分光光度计测出溶液中柠檬黄、日落黄、和胭脂红的浓度。
二、实验条件
仪器:
紫外可见分光光度计,电子天平;容量瓶、移液管、烧杯等玻璃仪器。
试剂:
柠檬黄、日落黄、胭脂红(试剂说明见附录2);乙酸铵;光学纯水;
三、实验方案(方法、步骤)
一、先各称取100mg的柠檬黄、日落黄、胭脂红,用三个100ml容量瓶配置成1mg/ml的母液,在分别将每种母液用量筒量取4ml、6ml、8ml、12ml、16ml到100ml容量瓶稀释成40ug/ml、60ug/ml、80ug/ml、120ug/ml、160ug/ml的子溶液,则有15瓶标准溶液。
二、分别测量80ug/ml(中间浓度)的柠檬黄、日落黄、胭脂红标准溶液的吸光度曲线,记录三者吸光度最大时的波长λ1 、λ2 、λ3 。
λ1
λ2
λ3
426 nm
482 nm
508 nm
三、分别测量15瓶标准溶液和待测溶液在波长λ1 、λ2 、λ3 时的吸光度。
λ1
λ2
λ3
柠檬黄
40ug/ml
0.119
0.036
0.003
60ug/ml
0.199
0.061
0.006
80ug/ml
0.285
0.087
0.008
120ug/ml
0.482
0.146
0.012
160ug/ml
0.675
0.204
0.015
日落黄
40ug/ml
0.050
0.114
0.098
60ug/ml
0.080
0.185
0.160
80ug/ml
0.121
0.282
0.243
120ug/ml
0.222
0.512
0.441
160ug/ml
0.320
0.739
0.634
胭脂红
40ug/ml
0.035
0.094
0.116
60ug/ml
0.056
0.153
0.188
80ug/ml
0.091
0.231
0.281
120ug/ml
0.139
0.366
0.447
160ug/ml
0.195
0.526
0.645
待测溶液
0.593
0.713
0.624
四、数据处理方法(拟采用的计算方法、程序、软件)
将所测得的数据用excel绘制出折线图,再绘制出趋势线,则趋势线的斜率即为该波长下物质的摩尔吸光系数,如下图所示:
由图可得
λ1
λ2
λ3
11=0.0047
21=0.0014
31=0.0001
12=0.0023
22=0.0053
32=0.0046
13=0.0013
23=0.0036
33=0.0044
根据朗伯-比耳定律有:
由测得数据可列方程组
将b=1,A1=0.593,A2=0.713,A3=0.624以及的值代入方程组用软件(如下图)可解得 C1=73.68 ,C2=68.56 ,C3=68.47 ;
结论: 该溶液由73.68ug/ml的柠檬黄、68.56ug/ml的日落黄和68.47ug/ml的胭脂红组成。
误差分析:
1)仪器误差:仪器本身存在一定误差;
2)操作误差:用天平、量筒、容量瓶量取时读数有一定误差,配置溶液以及最后测量时溶质残留造成一定误差。
五、思考题
1、分光光度计有哪些类型?分别有什么特点?
答:紫外可见分光光度计——应用广,灵敏度高,选择性好,成本低;
红外分光光度计——适合任何状态样品,分析时间短,特征性强;
原子分光光度计——灵敏度高,选择性好,速度快,应用广泛;
荧光分光光度计——灵敏度高,定性更可靠,干扰因素较多。
2、测定过程中产生误差的原因有哪些,并简要进行分析?
答:(1)用天平称取时,由于质量较轻,有一定误差;
(2)量筒以及容量瓶读数时凹液面对准刻度线,读数时存在一定误差;
(3)配置溶液以及最后测量过程中因为溶质残留造成一定误差。
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