猪论文猪核移植体细胞卵母细胞单精子注射U0126.docVIP

猪论文：猪体外生产体系优化 【中文摘要】ICSI技术 Intracytoplasmic sperm injection 即卵母细胞内单精子注射技术。临床上,利用该技术可以解决男性中由于精子数量少或精子活力低等造成的不育。然而该技术在猪中的应用却不太理想。据报道,ICSI猪卵子的受精率仅为20%左右。造成该技术效率低下的主要原因是由于卵母细胞的不完全激活与雄原核形成的失败。目前的研究显示U0126作为一种MAPK激酶特异抑制剂,可以通过抑制MAPK的激活来诱导卵母细胞的激活,提高猪卵母细胞的原核形成率。转基因克隆猪在构建人类疾病的动物模型和进行人类异种器官移植方面具有巨大的优势和应用潜力,是当今体细胞核移植领域研究的热点。虽然多个国家已经成功获得多种转基因克隆猪,但其效率依然很低。猪卵母细胞／胚胎的培养体系是猪体细胞核移植技术中最基本也是最为重要的环节,该系统的优化对克隆效率的提高有重大意义。本论文包括两大部分,第一部分是ICSI部分：检测不同激活方案对体外成熟猪卵母细胞原核形成和后期发育能力的影响。结果显示：ICSI卵母细胞在电激活之后间隔4小时用U0126处理受精率升高,三倍体形成率、卵裂率、囊胚细胞数没有显著变化。第二部... 【英文摘要】Intracytoplasmic sperm injection ICSI describes a procedure in which a single sperm is injected directly into the cytoplasm of an oocyte to facilitate fertilization. Clinically, this assisted fertilization approach is presently used for treating male infertility inmen with an extremely low number of and/or immotile spermatozoa.The application of ICSI in pigs has not been as simple as originally thought. It has been reported that fertilization rate by ICSI is low in pigs, e.g., about 20% on average. Althou... 【关键词】猪 核移植 体细胞 卵母细胞单精子注射 U0126 【英文关键词】pig Nuclear transfer somatic cell ICSI U0126 【索购全文】联系Q1：1座机电话号码 Q2：1座机电话号码 同时提供论文写作一对一辅导和论文发表服务.保过包发 【目录】猪体外生产体系优化 英文缩略词表 4-5 摘要 5-6 Abstract 6-7 第一部分 文献综述 10-19 第一章 ICSI胚胎精核解聚的机制研究 10-14 1.精子中的鱼精蛋 10-11 2.受精后精子核的去致密 11-12 3.组蛋白取代鱼精蛋白 12 4.原核的形成 12-13 5.父本染色质改变对受精和胚胎发育的影响 13-14 第二章:添加化学成分对体细胞核移植效率的影响 14-19 1.在成熟液中添加化学成分对SCNT的作用 14-16 2.去核方法对SCNT效率的影响 16 3.在胚胎发育液中添加CSF-2等物质对SCNT效率的影响 16-18 4.展望 18-19 第二部分 实验研究 19-29 实验一 利用U0126间隔不同时间处理ICSI猪卵母细胞对其原核形成及其后期发育的影响 19-26 1.实验材料与仪器 20-22 2.实验方法 22-23 3.实验步骤 23-25 4.实验设计 25-26 实验二 转基因克隆:各种优化条件对猪体细胞核移植效率的影响 26-29 1.实验仪器与材料 26-27 2.实验方法 27 3.核移植的操作过程 27-28 4.实验设计 28-29 4.1.实验一 不同化学激活剂对克隆胚胎发育的影响 28 4.2.实验二 利用新鲜和冷冻细胞对融合率及克隆后期发育的影响 28 4.3.利用体细胞和转基因细胞对融合率和克隆发育的影响 28 4.4.向成熟培养液中添加褪黑素对猪转基因效率的影响 28-29 第三部分.实验结果与分析 29-32 1.数据分析 29 2.实验结果 29-32 2.1.利用U0126间隔不同时间处理激活后猪卵母细胞对其原核形成及其后期发育的影响 29-30 2.2.各种优化条件对猪体细胞核移植效率的影响 30-32 2.2.1.不同化学激活剂对克隆胚胎发育的影响 30 2.2.2.利用新鲜和冷冻细胞对融合率及克隆后