间质性肺炎病毒上吸道感染后病毒载量变化与急性中耳炎的发展.docVIP

间质性肺炎病毒感染上呼吸道后病毒载量的变化与急性中耳炎的发展 张伟 译，鲍诗平 审校 Johanna Nokso-Koivisto, et al. VIRAL LOAD AND ACUTE OTITIS MEDIA DEVELOPMENT AFTER HUMAN METAPNEUMOVIRUS UPPER RESPIRATORY TRACT INFECTION. The Pediatric Infectious Disease Journal ,2012,31(7):763-766. 摘要：研究上呼吸道感染（URI）人类病毒（MPV）在急性中耳炎的作用URI患儿700例鼻咽分泌物涂片进行评估；47例（7%）为MPV阳性，25（3.6%）MPV为病毒。总，仅24%MPV 的URI患儿伴发急性中耳炎，与其他呼吸病毒hMPV病毒载量MPV阳性URI患儿中，伴发急性中耳炎与未伴发急性中耳炎两组患者的病毒载量没有差异 关键词：肺间质肺炎病毒；上呼吸道感染；急性中耳炎；病毒载量 人类病毒（MPV），首次2001年[1]，它是一种呼吸道病毒，属于副粘病毒科，呼吸道合胞病毒（RSV）亚科。许多研究表明，几乎所有5岁MPV。综合各年龄组的情况，引起呼吸感染上呼吸道感染（URI）下呼吸道2–7]。 因为困难分子已用于hMPV感染的诊断。。临床疾病一种方式是通过病毒；有研究表明高MPV病毒载量和下呼吸道感染3,8,9]。 因MPV种系来源和临床1,5]，因此可以推MPV同样具有嗜耳性，有急性中耳炎（AOM）趋势鼻咽分泌物8–13%[11,12]和2.3%12]。但是hMPV诱发儿童急性中耳炎需要进一步的研究。 MPV在上呼吸道感染的中耳炎并发症中的发病机制以及明确hMPV病毒载量是否与上感后急性中耳炎的发病相关。 材料和方法 我们通过一项前瞻性的横断面研究收集标本和临床数据。该研究的目的旨在调查儿童上呼吸道感染伴发急性中耳炎的发病率和临床特点。研究2003年1月至2007月当地审查委员会批准德克萨斯州加尔维斯顿德克萨斯大学医学分校研究，6个月到3岁的健康儿童；随访1年的AOM的URI的发生。当URI症状父母研究人员。研究医生，随其后的4周AOM的发生。，耳镜检查体格检查、导抗。URIAOM，定义为URI出现后28天内发生的AOM。为：（1）急性症状（2）鼓膜炎症（3）存在中耳积液中耳炎倾向如1年中耳炎发作≥4，6个月内≥3，6岁≥6次或第一性中耳炎发作6?月龄。 在URI起病7天内和AOM呼吸道标本。鼻拭子病毒培养，（，écouen，）。管和获取尽可能多的。 拭子美国威斯康星州密尔沃基 具体到本报道，我们对727例鼻咽分泌物标本进行了hMPV的定量PCR分析（qPCR）。利用MagMAX全核酸纯化试剂盒(Ambion/Applied Biosystems, Austin, TX，in Biosprint 96，Qiagen, Valencia, CA)对200uL鼻咽分泌物标本进行核酸提取。完成提取后，用不含核酸的0.1mmol/L乙二胺四乙酸TaqMan(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO; Integrated DNA Technologies, Coralville, IA )探针 (Bio-Rad)，1 uL（5uM）hMPV和hRSV引物，0.5uL（7.5uM）hMPV-6-碳荧光素和RSV-TX红探针，4.5ul无核酸液和3uLcDNA模板。qPCR由CFX实时PCR仪（Bio-Rad）完成。病毒质粒能够吸附在操作时并行产生的PCR靶物上，形成标准曲线，由此得到病毒滴度。鉴于qPCR能够定量分析阳性反应物，双联法能够检测出50%以上已标记标本微达10个拷贝的病毒量，该法为我们提供了较其他报道更为敏感的检测方法。 为评价RNA和cDNA的质量，我们对每一例鼻咽分泌物标本进行人3-磷酸-甘油醛脱氢酶[14]的平行qPCR检测。检测量低于500拷贝提示该标本质量不可靠，在进一步检测中该标本将会被剔除。收集的864例URI标本中，700例标本通过了3-磷酸-甘油醛脱氢酶检测，占总数的81%。 根据原始样本的稀释比例和RNA提取、qPCR分析过程的稀释比例，我们可以计算每毫升样本中RNA拷贝数。700例URI样本中有58例因鼻咽分泌物稀释比例不明而无法计算RNA拷贝数。因此，我们共计算出了642例URI鼻咽部分泌物样本的病毒载量。 将病毒载量值进行自然对数转化之后，我们采用Mann-Whitney秩和 结 果 参加hMPV研究的200位受试患儿中，49%为女性，59.5%为白种人，28%为黑人，3%为黄种人，9.5%为混血人种；45%为西班牙裔，55%非西班牙后裔。大多数患儿没有参加托管（66%），53%的