食品微生物学基础实验指导2010上课版.doc.docVIP

中国农业大学自编教材 食品微生物学基础实验指导 （食品专业本、专科使用） 食品微生物教研组 2010.3  微生物学实验的目的与要求 微生物学实验是微生物学的重要组成部分，也是学习微生物学的一个重要环节。通过实验操作，可以加深和巩固对课堂讲授内容的理解。训练学生掌握最基本的操作技能；了解微生物学的基本知识；培养学生观察、思考、分析解决实际问题的能力；实事求是、严肃认真的科学态度和勤俭节约、爱护公物的良好作风。 为了上好微生物学实验课，并保证安全，实验时要注意如下事项： 1．为了保证实验室的整洁和实验的顺利进行，非必要的物品和书包，不得带入室内，实验时不得高声谈话和随意走动。 2．每次实验前要对实验内容进行充分预习，了解实验的目的、原理和方法，做到心中有数，并作合理安排。 3．实验中要认真观察，及时做好实验记录。对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需记下每次观察的现象和结果，以便分析。 4．实验操作应严格按操作规程进行，万一遇有带菌物品洒漏、皮肤破伤或菌液吸入口中等意外情况发生时，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。 5．实验过程中，切勿使乙醚、丙酮、酒精等易燃药品接近火源，如遇火险，应先关掉火源，再用湿布或沙土掩盖灭火。必要时用灭火器。 6．凡实验用过的菌种以及带有活菌的各种器皿，应先经高压灭菌后才能洗涤。制片上的活菌标本应先浸泡于3％来苏儿溶液或5％石炭酸溶液中，半小时以后再行洗刷。如系芽孢杆菌或有孢子的菌，则应适当延长浸泡时间。 7．实验中需进行培养的材料，应注明组别、名称及处理方法，实验完毕，应将仪器、用具等洗净，放好，做好桌面及地面的清洁工作。 实验目录 实验一 　培养基的制备、灭菌及无菌检测技术………………………（4） （一）实验室内微生物的检测………………………………………（4） （二）培养基的配制与灭菌…………………………………………（5） 实验二 微生物染色技术………………………………………………（9） （一）细菌涂片及简单染色法………………………………………（9） （二）革兰氏染色法…………………………………………………（11） （三）细菌的特殊结构染色…………………………………………（13） （四）生物显微镜的构造、使用和保养……………………………（15） 实验三 　微生物形态观察与接种技术…………………………………（19） （一）细菌培养特征的观察…………………………………………（19） （二）霉菌的形态观察………………………………………………（21） （三）放线菌的形态观察……………………………………………（24） （四）假丝酵母假菌丝的培养及观察………………………………（26） （五）微生物的接种技术……………………………………………（27） 实验四 　食品中细菌总数及大肠菌群的检验…………………………（29） 附件一 染色液的配制…………………………………………………… (36) 附件二 教学用培养基…………………………………………………… (38) 附件三 常用试剂及溶液的配制 …………………………………………(41) 附录四 大肠菌群最可能数(MPN)检索表……………………………… （43） 实验一 培养基的配制、灭菌及无菌检测技术 （一）实验室内微生物的检测 一、目的和要求 微生物在自然界广泛存在，在实验室内亦不例外。由于其个体小，人们用肉眼看不到。只有通过微生物的大量繁殖形成微生物群体，即菌落，肉眼才能看到它们。 通过实验证明实验室内有各种微生物的存在，对微生物有初步的认识，并在今后的微生物学实验中注意无菌操作，防止杂菌污染，保证实验结果的可靠性。 二、实验材料 灭菌的牛肉膏蛋白胨培养皿、灭菌棉球、镊子、灭菌牙签、记号笔等 三、操作步骤 以3—5人为一组，取4—6个已倒好灭菌的牛肉膏蛋白胨培养皿，一皿对照不要打开盖，其余每人1皿，每组成员分别选择下列任何一种方法加以处理并在皿上写明班级、姓名、日期及处理方法。 (1)打开培养皿盖，在空气中暴露约10分钟，然后盖上皿盖。 (2)打开培养皿盖，用手指触摸培养基表面2—3个点，注意不要将培养基弄破，然后盖上皿盖。 (3)取自己的头发约5cm长3—5根打开皿盖用镊子放于培养基表面。然后盖上皿盖。 (4)用灭菌牙签取少量牙垢，打开皿盖涂于培养基表面，注意不要将培养基弄破，然后盖上皿盖。 (5)用灭菌棉球在实验台(或凳子)上擦两下，打开皿盖，在