副猪嗜血杆菌的离与鉴定.doc

副猪嗜血杆菌的分离与鉴定 李晓华 *杨小燕 郑新添 戴爱玲 李改娜 （福建龙岩学院生命科学学院 预防兽医学与生物技术福建省高等学校重点实验室 福建省人畜寄生与病毒性疫病防控工程技术研究中心 福建龙岩 364000） 摘要：从福建省龙岩市l例临床症状、病理剖检变化疑似副猪嗜血杆菌病的患病猪的关节液中分离到1株革兰氏染色阴性可疑菌株，经卫星现象、生化鉴定等实验室诊断，进一步以副猪嗜血杆菌的16 S rRNA基因设计特异性引物进行PCR鉴定，确定该分离菌为副猪嗜血杆菌。、、、、氟苯尼考、磺胺类Isolation and Identification of Haemophilus parasuis Xiaohua-Li xiaoyan-Yang xintian-Zheng ailing-Dai gaina-Li 1. College of Life Sciences, Longyan University, Longyan, Fujian Province 364000, PR China 2. Key Laboratory of Preventive Veterinary Medicine and Biotechnology, Longyan University, Longyan, Fujian Province 364000, PR China 3. Engineering Research Center for the Prevention and Control of Zoonosis，Fujian Province 364000, PR China Abstract：A covey of swine whose clinical symptoms looked like Haemophilus parasuis disease were checked by lab technologies．Research as bacteria observation，cultural characteristics and biochemical properties of Haemophilus parasuis were done．According to the sequence of bacterium l6S rRNA，special primers were designed for PCR amplification. The results showed that the strain was tentatively identified as Haemophilus parasuis．The drug sensitive tests showed：the strain was sensitive to 环丙沙星、、、、氟苯尼考、磺胺类Key words：Haemophilus parasuis；isolation and identification; drug sensitive test —————— 李晓华 1968、8— ,女,福建长汀人，高级实验师，主要从事实验室管理及动物疫病防控研究。 基金项目：福建省科技厅创新平台建设项目（FJ200812） Haemophilus parasuis，Hps 又称“革拉瑟氏病” Gllisser’s Disease ，是由副猪嗜血杆菌 Haemophilusparasuis 引起的一种以多发性浆膜炎和关节炎为特征的疾病[1]。该菌寄生在健康猪鼻腔等上呼吸道内，主要通过空气直接接触传播，其他传播途径如消化道等亦可传播[2]。主要影响2～4周龄的猪，感染高峰为4～6周龄的猪[3]，发病率在10%～15%，严重时病死率可达50%。随着规模化养殖和养殖密度的增加，近年来，该病的发病率和死亡率均呈上升趋势，成为危害规模化养猪场最严重的细菌性疾病之一，给养猪业造成巨大的经济损失。2008年10月，福建龙岩某规模化猪场5—8周龄的保育猪发病严重,临床症状主要表现为精神沉郁、食欲减少，体温升高40-41℃,流鼻涕,腹式呼吸,被毛粗乱，消瘦、关节肿大，病猪不愿站立，跛行，病程达4个多月，发病率40%。剖检病变主要表现为体内有水肿、充血、血液不凝,呈暗红色,全身脏器多数有出血斑点,膀胱粘膜和肾皮质点状出血,喉、会咽斑状出血,胸腔内有大量淡红色液体、纤维性渗出物;肺脏呈纤维素性胸膜肺炎,腹腔内有大量透明黄褐色渗出液Hps发病仔猪的肺脏、心血、关节积液、心包液、气管。 1.1.2 培养基 普通琼脂培养基、鲜血琼脂培养基、巧克力琼脂培养基由实验室配制、胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）培养基购于青岛海博公司；0.005%NAD巧克力琼脂培养基、SS培养基、麦康凯