苦参总碱纳米乳的理化性质及其体外透皮实验研究.docVIP

苦参总碱纳米乳的理化性质及其体外透皮实验研究 　　[摘要] 该实验主要考察苦参总碱纳米乳的理化性质、稳定性及体外透皮特性。制备苦参总碱纳米乳，采用HPLC测定纳米乳中苦参碱和氧化苦参碱的含量，分别采用透射电镜和激光粒度仪观察纳米乳的形态和测定粒径，并对苦参总碱纳米乳在低温（4 ℃）、常温（25 ℃）以及高温（60 ℃）条件下的稳定性进行考察。最后采用Franz扩散池对纳米乳的体外透皮特性进行研究。结果发现该实验制备的苦参总碱纳米乳外观圆整、均匀，平均粒径为（15.55±2.24） nm，粒径分布值0.161；在4，25，60 ℃条件下放置15 d，其外观、粒径及含量未发生明显变化；苦参总碱纳米乳的稳态渗透速率 J 为4.564 1 μg·cm-2·h-1；24 h的累积渗透量为110.7 μg·cm-2，是水溶液24 h累积渗透量（59.41 μg·cm-2）的1.86倍。实验表明苦参总碱纳米乳具有良好的透皮效果，可为其临床应用提供一种新剂型。 　　[关键词] 苦参总碱；纳米乳；理化性质；体外透皮 　　[收稿日期] 2013-03-24 　　[基金项目] 北京中医药大学在读研究生资助项目；北京中医药大学复方中药制药研究创新团队项目（2011-CXTD-13） 　　[通信作者] *王英姿，副教授，硕士生导师，主要从事中药新剂型与新技术研究，Tel： （010E-mail：wangyzi@ 　　[作者简介] 冯艾灵，硕士研究生，E-mail：fengailing6167@ 苦参总碱系从豆科槐属植物苦参根中提取的生物碱，因其具有清热燥湿、止痒安神的功效而历来为中医治疗皮肤病所推崇[1]。研究表明，用苦参总碱治疗急性、亚急性湿疹用药安全，且无抗组胺药物的嗜睡及皮质激素的不良反应[2]。但其现有治疗湿疹的剂型主要是汤剂、注射剂、乳膏、软膏、洗剂等，均存在使用不方便，药物维持作用时间短，易污染衣物等缺点。 　　纳米乳（nanoemulsion，NE）又称微乳，作为一种新型的药物载体，具有许多其他透皮制剂不可比拟的优点[3-4]：可极大地增加难溶性药物的溶解度，具有热力学稳定性，制备方法简单，显著增加药物的局部传递以及延长药物的作用时间等。因此，在前期研究中，笔者采用伪三元相图法和星点设计-效应面法对苦参总碱纳米乳的处方组成及制备工艺进行了筛选和优化，本实验拟对其理化性质、稳定性和体外透皮特性进行研究，从而为苦参总碱临床治疗湿疹新剂型的开发应用奠定基础。 　　1 材料 　　高效液相色谱仪（SIL-20A自动进样器，SPD-20A紫外-可见检测器，日本岛津公司）；BSI10S型1/1万电子分析天平（赛多利斯仪器系统有限公司）；DL-5-B型离心机（上海安亭科学仪器有限公司）；HJ-6A多头磁力搅拌器（常州国华电器有限公司）；TK-12D型透皮扩散试验仪（上海锴凯科技贸易有限公司）。 　　苦参总碱提取物（宁夏紫荆花制药有限公司，1 g相当于原生药材125 g）；苦参碱对照品（中国食品药品检定研究院，批号11805-200508）；氧化苦参碱对照品（中国食品药品检定研究院，批号110780-201007）；IPM（国药集团化学试剂有限公司）；无水乙醇（北京化工厂）；聚氧乙烯35蓖麻油（北京凤礼精求商贸有限责任公司）；甲醇、乙腈（Fisher公司，色谱纯）；磷酸二氢钠、磷酸氢二钠（北京化工公司）。 　　雄性SD大鼠，180～220 g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，动物许可证号SCXK（京）2012-0001。 　　2 方法与结果 　　2.1 苦参总碱纳米乳的处方和制备工艺 　　在前期处方筛选和工艺优化的基础上，确定了苦参总碱纳米乳的处方组成和制备工艺。苦参总碱纳米乳由油相（IPM）、表面活性剂（EL35）、助表面活性剂（无水乙醇）、水相及苦参总碱提取物组成。 　　按上述处方组成将苦参总碱溶入IPM，加入EL35和无水乙醇，溶解混合为含药内相，在室温下采用磁力搅拌器搅拌至均匀。然后边搅拌边缓慢滴加去离子水到含药内相中，并恒速搅拌至澄清透明，即得苦参总碱纳米乳。 　　2.2 苦参总碱纳米乳中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定 　　2.2.1 色谱条件 Agilent Technologies Zorbax Extend C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相乙腈（A）-甲醇（B）-磷酸盐缓冲液（pH 6.8，C），梯度洗脱，0～25 min，3%A，25～40 min，3%～11%A，40～45 min，11%～3%A，流速1.0 mL·min-1；柱温35 ℃；检测波长220 nm；进样量10 μL。 　　2.2.2 溶液的配制 对照品溶液的配制：精密称取苦参碱对照品0.