蛋白质生物合成过程.docVIP

第二节 蛋白质生物合成过程 述：蛋白质生物合成过程包括起始、延长、终止三阶段。起始阶段是30S小亚基、mRNA、50S大亚基的依次结合；延长阶段核糖体延mRNA 移动，肽链不断延长；终止阶段多肽链释放，核蛋白体解体，mRNA释放。 ＊mRNA密码的阅读方向：5 → 3 对应肽链的氨基酸序列合成方向：N → C ?一、肽链合成的起始（以原核生物为例） 述：肽链合成的起始阶段是mRNA和起始甲酰甲硫氨酰-tRNA（fMet-tRNAfmet）分别与核糖体结合形成起始复合物的过程。 多种起始蛋白因子（IF）参与肽链合成起始阶段。 （一）核糖体大小亚基的分离 ??1．原核起始因子IF及作用 ⑴IF3：亚基分离 ⑵IF2：结合GTP，促进fMet-tRNAfmet就位。 ⑶IF1：辅助IF3 、IF2 ??2．大小亚基分离过程 述：当一条多肽链合成终止时，IF3 、IF1 与核糖体的小亚基结合，促使完整核糖体的大小亚基分离，为mRNA与小亚基的结合作好准备。 （二）mRNA在核糖体小亚基上的定位结合 1．启动步骤：mRNA与30s形成复合物,IF1、IF3参与复合物的形成 2．结合机制： mRNA中的SD序列与30s的互补序列结合 具体过程见下页。 ☆ mRNA的S-D序列：AUG上游约8～13核苷酸处，4 ～6 个核苷酸，富含嘌呤，AGGA为核心 ☆小亚基16srRNA近3端的短序列...UCCU....与S-D序列互补 ☆核蛋白体小亚基蛋白（rps-1）辨认结合AGGA后的短序列 （三）起始fMet-tRNAfmet辨认结合AUG 述：该过程与mRNA和核糖体小亚基的定位结合同时发生，fmet-tRNAfmet辨认并与mRNA 模板中的AUG结合。反应 需IF2、GTP、Mg2+参与；而IF3脱落。 （四）核糖体大亚基的结合 述：上述过程完成后，核糖体大亚基开始进入，与小亚基结合。 此时与IF2结合的GTP水解释能，促使IF1 、IF2、IF3脱落, 形成翻译起始复合物――核糖体＋mRNA＋fmet-tRNAfmet 述：核蛋白体上含给位（P位）与受位（A位），AUG信号与 P位相对应结合。同时fmet-tRNA的反密码子CAU与 mRNA的AUG互补结合，A位空留，对应mRNA的AUG 后的第二个遗传密码，准备相应氨基酰-tRNA的进入。 附：肽链合成的起始图 mRNA +30S亚基-IF3 ↓IF1 30S亚基? mRNA IF3- IF1复合物 ↓IF2-GTP-fMet-tRNA IF3 30S? mRNA ? GTP- fMet –tRNA- IF2- IF1复合物 ↓50S亚基 IF2+ IF1+GDP+Pi 70S起始复合物 二、肽链的延长――又称“核糖体循环” 述：延长即核蛋白体自mRNA 5端向3端推进，反应需延长因子 EF-Ts、EF-Tu和EFG 、GTP和无机离子参与。 延长因子 作用 EF-Ts、EF-Tu 进位，结合ATP EFG 转位酶，tRNA释放 ?[步骤]?（一）进位 1．过程：与氨基酸密码相应的氨基酰-tRNA进入核糖体A位 2．条件：反应需GTP 、Mg2+ 、K+ 、EFTu 3，产物：氨基酰- tRNA- EF-Tu-GTP复合物 ?（二）成肽 1．过程 ⑴第一个肽键合成：P位的fMet退至A位与A位上AAcyl-tRNA的氨基结合成肽 以后的成肽： P位肽酰基与A位上AAcyl-tRNA的氨基结合成肽。 生成的肽酰-tRNA位于A位，P位上失去fMet（肽酰基）的tRNA在成肽结束前释放，P位留空。 2．条件：反应需转肽酶、Mg2+、 K+ 参与 （三）转位 1．过程 ⑴在EFG作用下，结合并水解1分子GTP，促进核糖体向mRNA 3端移动一个密码子的距离 ⑵带肽键的tRNA由A位移至P位,而A位留空，对应A位的mRNA上出现一个新的密码，等待对应AAcyl-tRNA的来临。 2．条件：反应需EFG（具有转位酶活性）、GTP、Mg2+ 参与 述：肽键每增加一个氨基酸就按 进位→成肽→转位 这三步 不断重复，直到肽链增长到必要的长度。 三、肽链合成终止 ☆释放因子RF：识别终止密码并与之结合；同时触发核糖体的 构象的改变，诱导转肽酶转变为酯酶活性，水 解肽酰-tRNA的酯键，促进多肽链释放。 ☆核蛋白体释放因子RR：促进tRNA、mRNA、RF从核蛋白体释放。 ☆IF3、1或eIF：大、小亚基解离。 1．过程 ⑴?RF1、RF2识别终止密码，进入A位。⑵?RF3使转肽酶变为水解作用，使P位上肽键与tRNA之间的 酯键被水解分离。肽链自核蛋白体释出 ⑶ 在RR作用下，tRNA、核蛋白体自mRNA上脱落，在IF1 作用下，核蛋白体分解为大、小亚基重新进入