标记活细胞内蛋白质的化学标签技术方案.doc

本科毕业论文 论文题目：标记活细胞内蛋白质的化学标签 学生姓名： 冉珊珊 学号： 201001020229 专业： 应用化学 指导教师： 李平 教授 学 院： 化学化工与材料科学学院 2014年5月9日 毕业论文（设计）内容介绍 论文（设计） 题 目 标记活细胞内蛋白质的化学标签 选题时间 完成时间 2014.5.9 论文（设计） 字数 9805 关 键 词 标签、蛋白、多肽、标记、荧光团、选择性、成像 论文（设计）题目的来源、理论和实践意义： 题目来源：学生自主选题，教师指导。 理论和实践意义：随着科学技术的发展，活细胞内蛋白质标记技术在不断提高，与活细胞内蛋白质标记课题相关的文章也越来越多，但这类文章大都只对蛋白质标记课题的一个方面或几个方面进行了的阐述，一些综述性的文献相对缺乏。基于这种现状，我查阅了许多文献，发现其中一篇文献对活细胞内蛋白质标记技术阐述的较为全面、条理和清晰，所以我对这篇文献进行了翻译，并进行了分析和整理。我相信，这样的一篇综述性质的文章一定能够为研究人员提供一个比较清晰明确的学习和研究思路。 论文（设计）的主要内容及创新点： 主要内容：本文主要讲述了本世纪以来，在标记活细胞内蛋白质技术中，除荧光蛋白之外的几种主要的化学标签，以及化学标签的应用。 创新点：化学标签通过让具有较高的光子输出和专之外在未来十年化学家能够利用这些标签创造全新的光谱活细胞生物学机制 摘要 1 Abstract 1 一、引言 2 二、化学标签的类型 2 （一）基于蛋白质的化学标签 3 （二）基于肽的化学标签 5 三、化学标签的应用 6 （一）化学标签开启高分辨率成像 6 （二）化学标签在细胞成像中应用的主题和变化 7 （三）化学标记是生物素/链霉亲和素在体外应用的替代品 8 四、化学标签的展望 8 五、致谢 8 参考文献 9 标记活细胞内蛋白质的化学标签 冉珊珊 （山东师范大学化学化工与材料科学学院） 摘要： 上个世纪，化学方法应用于选择性地标记试管中的蛋白质，对体外生物物理学起到了重要作用，在面临理解本世纪活细胞中蛋白质如何运作这一挑战时，化学标记技术仍然可以起到突破性作用。利用化学标记技术，目的蛋白附着到一个多肽，而不是一个荧光蛋白。随后用有机荧光团或其它探针修改多肽。FlAsH肽标签于1998年首次报道。自那时以来，更精致的蛋白质标签，例如TMP和SNAP标签，提高了选择性，并使细胞内蛋白质以高信噪比成像。进一步改进仍然需要实现强大的荧光基团直接掺入，但酶介导的化学标签能够克服选择性标记短肽标签的难题。这篇报告中，我们专注于化学标记在研究活细胞内蛋白质工作方式的开发和应用。因此，对于不同的化学标记策略和技术，我们重视标记反应足够的选择性和荧光探针对细胞内蛋白质高信噪比成像。 关键词:蛋白、多肽、标记、荧光团 Abstract: Chemical methods for selectively labeling proteins in the test tube significantly impacted in vitro biophysics in the last century, and chemical tagging technologies are now poised to provide a breakthrough to meet this centurys challenge of understanding protein function in the living cell.With chemical tags, the protein of interest is attached to a polypeptide rather than an FP. The polypeptide is subsequently modified with an organic fluorophore or another probe. The FlAsH peptide tag was first reported in 1998. Since then, more refined protein tags, exemplified by the TMP- and SNAP-tag, have improved selectivity and enabled imaging of intracellular proteins with high signal