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REAGEN泰乐菌素酶联免疫反应测试盒.doc
REAGEN?泰乐菌素酶联免疫反应测试盒
RND99006
1.试剂盒描述
REAGEN?泰乐菌素酶联免疫反应测试盒是用于等中残留的定量检测。其特包括:
高重性。快速的ELISA检测方法(在不考虑样品数量下只需不到2小时)。2.试剂盒原理
本方法基于竞争性酶联反应原理,含有的药物抗原已经包被于微孔板上,在分析时,样品中药物特异性地与一抗相结合。如果药品中有药物存在,它将阻止包被于微孔板上的药物与一抗结合。当与样品药物相结合的药物抗体被洗涤去除后,只剩下与微孔内药物相结合的抗体,与经酶标记的二抗相结合3.试剂盒组成Tylosin-Coated Plate 1 x 96孔 8 孔 x 12排 2-8 C 泰乐菌素标品:
阴性质控 白帽
1 ng/mL 黄帽
2.5 ng/mL 橙帽
5 ng/mL 粉帽
10 ng/mL 紫帽
25 ng/mL 蓝帽
1000 ng/mL 高标,可选,红帽
0.8 mL
0.8 mL
0.8 mL
0.8 mL
0.8 mL
0.8 mL
0.8 mL 2-8 C 一抗 Tylosin Antibody #1 12 mL 2-8 C * 100X酶标二抗 100X HRP-Conjugated Ab.#2 250 L 2-8 C * 二抗稀释液 Antibody #2 Diluent 20 mL 2-8 C 样品提取液 Sample Extraction Buffer 25 mLX 2 2-8 C 20X洗液 20X Wash Solution 28 mL 2-8 C 终止液 Stop Buffer 14 mL 2-8 C 底物 TMB Substrate 12 mL 2-8 C 蜂蜜平衡液 Honey Balance Buffer Optional 25 mL X 2 2-8 C
本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存,有效期为一年。如果个月内不使用试剂盒,应置于-20℃或者冷冻保藏。
检测下限
检测物质 检测下限(ng/g) 10 快速法 ;2.5 有机法 蛋 10 快速法 ;2.5 有机法 蜂蜜 2 奶 10 肉/肝/肾 10 尿 20
5.交叉反应:药物 交叉反应 % 泰乐菌素100 螺旋霉素Spyramicin) 8 替米考星Tilmycosin) 0.05 四环素 0.01 庆大霉素 0.01 氨苄青霉素 0.01 氟苯尼考 0.01
6.未提的设备或材料
酶标仪
恒温培养箱匀质器
旋转蒸发仪或者氮吹仪
漩涡振荡器
微量加样器 10、20、100和1000 L各一支
多道枪:50-300 L
乙腈实验前请阅读以下文字,以保证获得最佳实验效果。
标准品中含有泰乐菌素,请小心使用。
不要使用过期的试剂盒。
不同批次的试剂盒不要混用,抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。确保抗稀释液正确配制。
尽量保持室温20-25℃,避免在通风口操作防止温度过低,过热和/或者蒸发。同样的,不要在阳光直射下实验,防止过热及蒸发。在孵育期间,如果工作台温度过低,应该铺垫若干纸巾或者其他物料。
水质量很重要,确保使用蒸馏或者去离子水。
加入样品或者试剂到空的微孔板时,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接触。
孵育时间的计算越规范越好,保持添加标准品的一致性,先添加标准品后添加样品。
从低浓度到高浓度地添加标准品,降低影响标准品曲线质量的风险。将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中,冷藏保存.的准备()使用合适的匀浆器匀质样品;
(2)称取1g样品,加mL蒸馏水;
(3)匀质分钟;(4)(如果不够澄清,使用Whatman1号滤纸过滤)()取mL上清液,加入mL 1×样品提取液,取50μL样品进行检测。稀释倍数:(1)使用合适的匀浆器匀质样品;(2)称1g样品,加入5ml,()000转离心10分钟
(4)取ml上清液,50-60蒸馏或者氮气吹干
(5)加入ml1×样品提取液,剧烈震荡2分钟离心分钟,取50μL检测
稀释倍数:2()使用合适的匀浆器匀质样品;
(2)称取1g样品,加mL蒸馏水;
(3)匀质分钟;
(4)4冷藏样品(如果不够澄清,使用Whatman1号滤纸过滤)()取mL上清液,加入mL 1×样品提取液,取50μL样品进行检测。稀释倍数:(1)使用合适的匀浆器匀质样品;(2)称1g样品,加入5ml,()000转离心10分钟,
(4)取ml上清液,50-60蒸馏或者氮气吹干
(5)加入ml1×样品提取液,震荡分钟,()()取50μL检测
稀释倍数:2()称g样品0.5 mL 蜂蜜平衡液,加入ml乙腈, 400 rpm 或震荡10min;
()000转离心10分钟ml上清液,50-60蒸馏或
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