高压提取香菇多的详细方案.doc

高压提取香菇多糖的详细方案 高压提取技术是在常温条件下，提取香菇原料中的有效成分的新技术。 这里说的高压是指压力在100MPa以上，甚至高达1000MPa以上的流体静压力。全称为“超高冷等静压”（Ultra high isostatic hydrostatic pressure at roomtemperature），简称为高压（High hydrostatic pressure，HHP），或高压（Ultra highpressure，UHP）。高压技术应用在工业领域已有多年的历史，19世纪末被应用到食品领域。近年来张守勤[38]等将高压技术应用于中药有效成分的提取，在国内外尚属首次，这一技术的发明与研究，加快了我国中药现代化的步伐。高压提取技术是在常温条件下，提取生物原料中的有效成分的新技术。可以提取的有效成分有：生物碱、活性多糖和低聚糖、芳香油、脂质类、黄酮、甙类等水溶性、醇溶性、脂溶性和溶于其它有机溶剂中的小分子成分。与煎煮法、回流法、索氏提取等传统提取技术相比较，高压提取技术可以大大缩短提取时间、降低能耗、减少杂质成分的溶出，提高有效成分的收率，而且高压提取是在常温下进行，避免了因热效应引起的有效成分结构变化、损失以及生理活性的降低，同时高压提取是在一个密闭的环境下进行的，没有溶剂的挥发，因此该技术更加符合“绿色”环保的要求。 高压在提取过程中的作用过程：在升压时，通过渗透作用，溶剂进入细胞内部，在此过程中细胞的结构在高压下受到不同程度的破坏。保压时，细胞内容物与进入细胞内部的溶剂接触，有效成分溶于这些溶剂中。在泄压过程中，细胞外部的压力减小为零，细胞内部的压力仍然保持平衡时的压力，即此时压力差与施加压力时方向相反。由于施加的是高压，因此这种反方向的压力差仍然是很大的，因此细胞壁变形而破坏，溶解了有效成分的溶剂泄出。如果在反方向压力作用下细胞壁的变形没有超过其反向变形极限，细胞内部已经溶解了有效成分的溶剂在高渗透压差下快速转移到细胞外，达到提取的目的。 高压系统包括高压容器及其封头，压力发生系统，温度控制装置和物料装卸系统。加料并封闭后，传压介质慢慢充满容器，高等静压就可以产生了。高压可以直接或间接产生，也可以通过加热传压介质产生。直接压缩使用小直径的活塞对传压介质施压，而大活塞用低压泵来驱动，直接压缩方式只能用于直径较小的实验设备。加热传压介质可以使传压介质膨胀，在提高温度的同时产生高压，因此通常用在需要高温和高压联合作用，而且整个压力容器内部的温度需要精确控制的场合。大多数工业等压缩系统均采用间接压缩方法，间接压缩使用增压器把传压介质泵入封闭的高压容器，直到达到要求的压力为止。  高压提取香菇多糖的工艺流程 将干燥的香菇子实体粉碎；称取要求量的香菇粉未，分别加入水、不同浓度的酒精溶液，混合成悬浊液；高压处理悬浊液；过滤，去除固体颗粒，得提取液。 高压提取的工艺流程如下图所示： 试剂：蒸馏水，苯酚，铝片， 固体，浓硫酸，葡萄糖 设备和仪器：100ml容量瓶，玻璃棒，蒸馏装置（温度计、沸石、三口烧瓶、冷凝管），电子天平，紫外分光光度计， 1、2、5、10ml吸液管，水浴锅，DL700-0.55×1.5超高压等静压机（上海大隆高压设备厂），真空泵，抽虑瓶。 实验前工作： 1、标准葡萄糖溶液的配制 精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖100.0mg，加蒸馏水溶解并定容于100ml容量瓶中，摇匀，配成浓度为1mg/ml标准葡萄糖溶液备用。 2、5%苯酚试剂的配制 苯酚水浴加热溶解后称取100g，加铝片0.1g(先用1：6的盐酸除去铝片表面氧化铝后，再称量使用)，加入碳酸氢钠30g，蒸馏，收集178-182℃的馏分，取馏出液7.5g，加入蒸馏水150mL，得5.0％的苯酚溶液，置于棕色瓶中备用。 3、标准曲线绘制 以葡萄糖作为标准品，采用苯酚—硫酸比色法，用紫外分光光度计测定多糖含量。精密吸取已配制的葡萄糖标准品溶液0.5，1，1.5，2，2.5，3ml置于6个50ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度线，摇匀。精密吸取2ml，分别加入5%苯酚溶液1ml，摇匀，迅速加入5ml浓硫酸，振摇5min，置沸水浴上加热15min，然后置冷水浴中冷却30min，以溶剂蒸馏水为空白作对照，在400～600nm内扫描，最大吸收波长为490nm。 在490nm处，测吸光值，以浓度为纵坐标，吸光值为横坐标，绘制标准曲线，得出葡萄糖标准品浓度Y（ug/ml）与吸光值X的回归方程：Y=15.336X-0.0298，R2=0.9997。在2.5～15.0 ug/ml范围内呈线性关系。 预处理： 将新鲜香菇清洗干净，除去其根部，将剩下的菌伞挤压，切小块放入真空干燥箱干燥，待香菇恒质量，放入粉碎机中粉碎，将粉碎后的香菇粉依次通过40，60，8