【参考】慢性肾脏病进展的机制研究.Doc

一、关键科学问题及研究内容 1.进展性肾脏病和肾纤维化的遗传因素及其致病机制 利用已建立的人群样本，对中国常见慢性肾脏病进行全基因组关联分析（GWAS）；利用已建立的患者样本和家系样本，研究肾小球足细胞骨架蛋白基因突变/多态性及其他基因突变与各种慢性肾脏病及其进展的关联，并针对易感位点进行功能研究；利用已建立的中国患者群样本，针对天然免疫补体系统和获得性免疫淋巴细胞激活分子，探讨遗传易感基因与免疫性肾脏病发生发展的关联；研究营养因素对基因组甲基化的影响及其在慢性肾脏病进展中的作用，以揭示中国人进展性肾脏病的高危人群和危险因素。 2.免疫性炎症对慢性肾脏病进展和肾纤维化的促进作用及其机制 利用已建立的中国患者群样本，以狼疮性肾炎、ANCA相关性肾炎、抗GBM肾病为切入点，探索肾组织免疫炎症过程中关键的补体活化途径和沉积机制；研究补体调节蛋白异常对补体系统功能的影响和导致免疫性炎症的机制；研究已确定的致病自身抗体（如ANCA和抗GBM抗体）所针对的关键抗原决定簇，并寻找与抗原决定簇扩散有关的同源性蛋白或病原微生物，以揭示免疫性炎症在慢性肾脏病进展中的促进作用及其分子基础。 3.代谢性炎症对慢性肾脏病进展和肾纤维化的促进作用及其机制 借助细胞模型和模式动物，系统研究炎症对肾脏细胞胆固醇重分布、肾脏泡沫细胞形成和组织损伤的机制；研究蛋白质氧化损伤对肾细胞的病理生物学活性、作用机制及对肾脏炎症和纤维化的影响；利用已建立的样本人群，研究叶酸缺乏和Hcys血症在慢性肾脏病进展中的作用及其分子机制。以阐明脂质代谢、蛋白质代谢和氨基酸代谢紊乱在代谢性炎症及肾脏病变进展中的作用和分子基础。 4.肾脏内分泌激素对肾脏损伤修复和肾纤维化的调控和机制 利用髓样细胞特异性MR基因敲除小鼠，阐明髓样细胞MR在肾纤维化中的调控作用及其机制；利用VDR基因敲除小鼠，明确活性维生素D对足细胞形态、功能以及足细胞中间丝蛋白Nestin表达的调控作用；建立间质细胞特异性PGIS基因敲除小鼠，揭示COX2-PGIS-PGI2通路在肾间质纤维化中的调控作用；利用SIRT1抑制剂分析SIRT1对足细胞、髓样细胞和间质细胞由VitD/VDR、醛固酮/MR、COX2-PGIS介导的下游生物学作用的影响，明确SIRT1是否通过MR、VDR参与肾脏炎症和纤维化的调控。 5.肾纤维化的细胞内信号分子及基因调控 利用转基因、基因敲除等技术系统，探讨Wnt/β-catenin信号通路在肾纤维化中的作用及其机制，利用化学文库筛选并鉴定特异性抑制Wnt/β-catenin信号的小分子抑制物，为研发干预肾纤维化的新药提供依据；寻找并鉴定参与调控肾纤维化的、Smad3依赖的miRNAs并阐明其作用机制，探索针对关键调节基因干预肾纤维化的新途径。 6.预警或评估肾纤维化的生物标志物或靶标 在既往对慢性肾脏病病理生理和DNA芯片研究的基础上，结合上述研究发现的生物标志物或关键靶标，改进PCR芯片构建技术，确立最优化的检测方法；构建基于肾纤维化病理生理机制的靶向基因芯片；通过比较分析不同分期慢性肾脏病患者及健康人尿液mRNA，确立进展性肾脏病的生物标志物。 应用靶向泛素化降解蛋白质技术构建与Smad3特异结合的protacs，探讨其防治肾纤维化的作用。  二、预期目标 （一）总体目标 发现中国人群与进展性肾脏病相关的易感基因及表观遗传因素；揭示免疫性和代谢性炎症对慢性肾脏病进展和肾纤维化的促进作用及其分子机制；确定肾脏内分泌激素对肾脏损伤修复和肾纤维化的调控作用及其机制；阐明肾纤维化的细胞内关键信号分子及基因调控；筛选预警或评估肾纤维化的生物标志物。获得一批原创性成果；找到新的防止慢性肾脏病进展的干预途径；在肾脏病研究领域，培养一批临床和基础紧密结合、适应―转化性研究‖的新型复合型人才。 （二）五年预期目标 1. 完成IgA肾病的GWAS分析；阐明肾小球足细胞骨架蛋白基因突变/多态性及其他基因突变与各种慢性肾脏病进展的关联和易感位点的致病作用；发现中国人与进展性肾脏病相关的新易感基因； 揭示天然免疫补体系统和获得性免疫淋巴细胞激活分子的遗传变异与免疫性肾脏病进展的关联；阐明Hcys血症对基因组甲基化的影响及其在慢性肾脏病进展中的作用，为中国人慢性肾脏病进展和肾纤维化的预警和风险评估提供理论依据。 2. 发现与我国常见慢性肾脏病发生发展相关的主要免疫学因素；明确肾脏免疫炎症过程中补体系统活化的关键途径及其沉积机制；揭示补体调节蛋白异常对补体系统功能的影响和导致免疫性炎症的机制；找到主要致病自身抗体的关键抗原决定簇和与抗原决定簇扩散有关的同源性蛋白或病原微生物，为干预免疫性炎症、防止慢性肾脏病进展和肾纤维化提供理论依据。 3. 深入认识代谢性炎症在中国人慢性肾脏病发生发展中的作用。揭示炎症对