人教版高中生物选修三课件：专题2222动物细胞融合和单克隆抗体(共18张)资料.pptVIP

* 学习目标： 1、说出动物细胞融合原理、过程和方法 2、单克隆抗体的原理和应用 重点和难点： 1.动物细胞融合的过程 2.单克隆抗体的制备和应用 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 动物细胞与植物细胞的差别： 无细胞壁 全能性受限制，不能发育成杂种动物 动物细胞杂交与植物细胞杂交的不同： 不需去除细胞壁 不能发育成新的动物个体 一、动物细胞融合（细胞杂交）P52 1、概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2、结果： 形成单核的杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性 4、诱导方式 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 5、动物细胞融合过程 动物细胞融合 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 植物体细胞杂交 去壁 融合 组培 不同DNA的两个细胞 灭活病毒诱导细胞融合 融合后的细胞进行有丝分裂 5、动物细胞融合过程 6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体 总结：比较植物体细胞杂交和动物细胞融合 用 途 诱 导 方 法 融合前处理 原 理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶、 果胶酶去壁 用胰蛋白酶 使细胞分散 物理、化学方法 物理、化学、 生物方法 获得部分 或完整植株 主要用于制备 单克隆抗体 提 问 ？ 1.抗体是由何种细胞产生的？ 效应B细胞（浆细胞）。 2.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？ 每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 3. 简述获得抗体的传统途径？ 抗原 动物体 抗体 抗原不纯 抗体不纯 二、单克隆抗体（单个细胞分裂产生的细胞群体分泌抗体） 刺激 浆细胞 体外培养淋巴细胞能无限增殖吗?怎样解决这个问题？ 4.这种方法获得的抗体有什么缺陷？ 产量低，纯度低，特异性差 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，但是不能无限增殖 骨髓瘤细胞能无限增殖，但不能产生抗体 设计方案： 动物细胞融合技术 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞 1、原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能够得到大量的单一抗体。 效应B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 （只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？融合细胞几种类型？ 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 多种杂交细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 专一抗体检验阳性 克隆上述杂交细胞 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 检验阳性细胞 单克隆抗体 注射到小鼠体内 体外培养 2、单克隆抗体的制备过程 第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。 第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞。 该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。 杂交瘤细胞有何特点？ 特异性强，灵敏度高 产生相应的B淋巴细胞 2.诱导其融合的方法有哪些？ 3.融合后培养液中有几种细胞? 4.怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点?原因？ 1.注射抗原的目的是什么? 5.大量增殖杂交瘤细胞和获得单抗的方法? 产生相应的B淋巴细胞 选择培养基 既能在体外无限增殖，也能产生特定的抗体 具有双亲细胞的遗传物质 培养液中或小鼠腹腔中培养 从培养液或小鼠腹水中提取 (2)、过程 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 诱导融合 B-B细胞 B-瘤细胞 瘤-瘤细胞 选择培养基 第一次筛选 杂交瘤细胞（ B-瘤细胞） 克隆化培养 专一抗体检测 第二次筛选 相应杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内增殖 单克隆抗体