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4.1 PE/Ag纳米防霉保鲜膜
将安全、缓释、广谱的无机抗菌材料,(银系纳米材料)经特殊工艺处理后,以填料的形式添加到保鲜膜中,来替代各种化学防腐保鲜剂,一方面减少贮藏
技术环节;另一方面可防止使用化学防霉保鲜剂带来的次生伤害和二次污染对产品消费产生的阻碍[123~130]。
4.1.1 材料与方法
4.1.1.4保鲜膜的物理性能测试
拉伸强度与断裂伸长度:按国标GB 13022—91测定;
水蒸气透过率(杯式法):按国标GB 10377—88测定。
4.1.1.5抑菌试验
(1)母粒抑菌效果试验[127]
滤纸圆片—培养基法,主要用于测试含银纳米母粒的抑菌效应,试验分四步进行:
①标准纳米防霉滤纸圆片制备:制备d=6mm的标准滤纸圆片数枚→高温灭菌→置于银系纳米母粒浸提液中浸泡1min→干燥滤纸吸干附表滞水→于无菌培
养皿中保存备用。
②标准孢子菌液制备:取50ml无菌容量瓶→加入少量无菌水→采样接种灰
霉菌孢子→定容→制备标准孢子菌液(浓度为15×109倍低倍镜下每视野80~100个左右孢子)→备用。
③接种培养基制备:于培养皿中加入PDA培养基(马铃薯培养基:马铃薯200g,琼脂15~20g,加水至1000ml,pH自然)上→点滴涂布试验第②步制备的标准孢子菌液0.5ml→制备成已接种灰霉菌的培养基→备用。
④纳米母粒抑菌处理:迅速将步骤①制备的4枚滤纸圆片均匀置于步骤③制备的培养基上→于26~28℃下恒温培养→定期测试抑菌圈面积,以常规PE母粒浸提液中浸泡的滤纸圆片为对照,计算相对抑制率。
相对抑制率(%)= ×100%
(2)保鲜膜制品抑制效果试验
薄膜圆片—孢子液法,主要用于测试含银纳米保鲜膜的抑菌效应,试验分三步进行。
①标准孢子悬浮液制备:取50ml无菌容量瓶→加入少量无菌水→采样接种灰霉菌孢子→定容制备浓度为3.8×105孢子/ml的标准孢子菌液→备用。
②标准纳米防霉保鲜膜样品制备:随机采样纳米保鲜膜片断→制成面积1×1cm2的保鲜膜方片→备用。
③纳米保鲜膜抑菌处理:取步骤①制备的标准菌液10ml→于50ml无菌三角瓶中→加入步骤②制备的纳米保鲜膜100片→于30℃恒温条件下800 N/min振荡培养→分别连续振荡2h、4h→取出1~2滴试液→显微镜下→测定孢子萌发数,以常规保鲜膜为对照。孢子萌发率和抑制萌发率计算公式为:
孢子萌发率(%)= ×100%
抑制萌发率(%) = ×100%
4.1.2 结果与分析
4.1.2.2纳米材料的抑菌效果
不同纳米母粒对灰霉菌的抑制作用如表4-1。4种含银纳米母粒中,试样1#、3#、4#对灰霉菌的抑制效果均50%(标准抑菌率),抑制效应1#3#4#2#。因此,这3种含银纳米材料均可以作为研制开发新型抑菌防霉保鲜膜的添加剂。
表4-1 不同银系纳米母粒对灰霉菌的抑制效果
Table 4-1 The inhibitory effect of Ag nano mother particle on grey mould
母粒编号 1 2 3 4 抑制率(%) 100 0 70 72.7 但4种样品膜对青霉菌抑制效应较弱,除4#对青霉菌有一定抑制力外,1#、2#、3#试样对青霉菌的生长繁殖几乎没有抑制作用,对细菌的抑制效应3#4#1#2#。
4.1.2.3纳米保鲜膜对真菌抑制效果
灰霉菌为葡萄贮藏期主要病害。因此,重点利用1#、3#、4#含银系纳米母粒研制保鲜膜。对灰霉菌的抑制效果如表4-2。其抑制作用与含银系纳米母粒效果一致,1#4#2#3#。但只有1#、4#纳米保鲜膜抑菌效应50%,故贮藏保鲜试验重点研究1#和4#保鲜膜。
表4-2 银系纳米保鲜膜对灰霉菌的抑制效果
Table 4-2 The inhibitory effect of Ag nano film on grey mould
处理 平均孢子萌发率(%) 抑制率(%) 1# 26.4 67.9 2# 45.7 44.4 3# 52.6 36.0 4# 30.2 63.3 水 82.3 -0.1 CK 82.2 0.0 * CK为常规葡萄专用保鲜膜,下同。
4.1.2.4纳米保鲜膜对灰霉菌抑制效应缓释性能分析
为了进一步测试纳米防霉保鲜膜的抑菌缓释性能,将试样1#、2#、3#、4#和对照膜经清水反复冲淋洗涤,然后再测试其抑菌作用,如表4-3。缓释效应3#1#2#4#,但3#试样的最大抑菌效应仅36%(50%)。因此,从总体效果来看1#最佳。表4-3 银系纳米保鲜膜洗涤前后对灰霉菌的抑制效应
Table 4-3 The inhibitor
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