秋水仙碱处理粗肋草丛生芽对其生长和诱变效应的影响.docVIP

秋水仙碱处理粗肋草丛生芽对其生长和诱变效应的影响 　　摘 要：以粗肋草去顶丛生芽为诱导材料，采用秋水仙碱处理方法进行了粗肋草多倍体诱变。结果发现：不同处理方式、秋水仙碱浓度和处理时间，粗肋草诱变率不同。采用浸泡法诱变率比混培法诱变率高，在一定范围内随着秋水仙碱浓度和处理时间的增加，粗肋草诱变率升高。用0.15%秋水仙碱浓度的液体培养基浸泡处理2d，诱变率最高，达到16.2%。变异植株明显矮化、变粗、叶片变厚、颜色变深，能耐10℃低温不受冻害。 　　关键词：粗肋草；丛生芽；秋水仙碱；诱变 　　中图分类号 S68 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）24-20-02 　　粗肋草（Aglaonema spp），又名亮丝草、广东万年青，为天南星科（Araceae）粗肋草属（Aglaonema Schott）多年生常绿草本植物[1]。粗肋草在国际上是极负盛名的室内观叶植物，其具有株型丰富、叶型繁多、高度耐阴、长势强壮、病虫害少等优点，近年来随着我国人民物质文化水平的提高，粗肋草品种受到了国人的青睐，走进了千家万户。 　　粗肋草品种大多不耐寒，温度低于12℃时容易出现明显冻害，过冬加温又存在能耗大、成本高的问题，严重影响了粗肋草产业的发展。而多倍体一般具有生长健壮、枝粗、叶厚、适应性强和抗逆性强等特点，在现代植物育种中得到了广泛的应用。迄今，我国尚无人工获得粗肋草多倍体的报道。本文旨在研究秋水仙碱处理对粗肋草丛生芽生长和诱变效应的影响，为建立粗肋草多倍体育种技术奠定基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 取东莞市生物技术研究所资源圃中红霞粗肋草茎段（图1），诱导丛生芽，继代5代后，将稳定正常生长的丛生芽去顶作为材料进行诱变试验。 　　图1 红霞粗肋草 　　1.2 方法 参照蒋洪恩、刘孟军的方法[2]，通过秋水仙碱混培法和浸泡法2种方法进行处理。混培法是将继代培养14d的丛生芽去顶，剩余约0.5cm左右，转接到含有0、0.1%、0.15%、0.2%、0.4%这5种不同秋水仙碱浓度的固体培养基上，分别共培养10d、20d、30d。浸泡法是将去顶的丛生芽转到含有0.1%、0.15%、0.2%、0.4%这4种不同浓度秋水仙碱的液体培养基中，在转速为90r/min的摇床上振荡培养1d、2d、3d。每个组合处理100株。处理后的丛生芽接种到不含秋水仙碱的继代培养基上培养2代（每代30d），接种时已褐变死亡的丛生芽不再转接。基本培养基成分为：MS+2-IP3.0mg/L+6-BA5.0mg/L+30g/L蔗糖。处理条件为温度（26±2）℃，光照时间16n/d，光照强度为1 5001x。 　　1.3 处理材料的观察与比较 处理后观察变异植株的形态特征，丛生芽继代2代后，统计致死率、变异率。将长有3～4片展叶的芽从基部切断，转到生根培养基上生根。生根培养基为1/2MS+2-IP 2mg/L+IBA 1mg/L+NAA0.1 mg/L+20g/L蔗糖+7g/L琼脂，pH5.8。30d后，将生根3～4条，根长3cm左右的生根苗连瓶放在自然散射光的大棚内炼苗14d。然后洗净培养基，晾干苗上水分后种植在泥炭：珍珠岩=3∶1的基质上，于温室大棚中种植60d。将变异植株与对照一起放到最低温度为10℃，最高温度为15℃的人工气候箱中种植30d，观察变异植物的耐寒情况。 　　2 结果与分析 　　2.1 秋水仙碱处理对粗肋草丛生芽生长和诱变效应的影响 经过秋水仙碱处理后，粗肋草丛生芽生长明显受到抑制，部分褐化，甚至死亡。混培法和浸泡法处理均能诱导粗肋草变异，变异植株在组培过程中表现出植株矮化、变粗，叶片卷曲、变厚，颜色变深的特征。 　　2种处理方法以浸泡法处理的变异率较高，结果如表1所示。随着秋水仙碱浓度和处理时间的增加，丛生芽致死率越来越高。而变异率并不与秋水仙碱浓度和处理时间呈简单正相关。在0.1%～0.15%浓度范围内，秋水仙碱浓度越高，诱变率越高；在相同秋水仙碱浓度下，处理时间越长，诱变率越高。0.15%浓度的秋水仙碱溶液振荡培养处理2d诱变率最高，达到16.2%。继续提高秋水仙碱浓度和处理时间，诱变率并不会提高，反而下降。未经秋水仙碱处理的丛生芽，未发现有明显变异，说明秋水仙碱能有效诱导粗肋草变异。 　　3 讨论 　　本实验通过秋水仙碱浸泡法和混培法2种方法处理粗肋草去顶丛生芽，获得了变异植株，说明秋水仙碱处理方法在粗肋草多倍体育种中同样适用。通过比较发现，浸泡法比混培法诱变效率更高，且浸泡法时间周期较短，所以丛生芽浸泡法最适合用于粗肋草多倍体育种。 　　本实验发现，在一定范围内，随着秋水仙碱浓度和处理时间的增加，粗肋草变异率增加，这与张志胜、谢利等[3]结果相似，但与何琳、张洁等[4]结果相反。这说明不同植