ELISA法检测丙肝患者血清中抗HCV的效果观察.docVIP

ELISA法检测丙肝患者血清中抗HCV的效果观察 　　摘要：目的：探究对丙肝患者使用ELISA方法对其血清中抗HCV进行测试的临床效果。 　　方法：选自我院2010年-2012年收治的丙肝患者共30例，以ELISA的方法对其血清当中抗HCV水平进行测试，将检测结果为阳性的标本再通过免疫胶体金试纸条对其进行检测，对比2种检测方法的一致性。 　　结果：所有患者接受ELISA方法进行检测之后血清结果均显示为阳性，使用胶体金吸附试验进行测试，有24例患者结果显示为阳性，阳性检出率明显低于ELISA方法，有统计学意义（P0.05）；ELISA法对抗原进行检测时浓度每升为1.25IU也能够将阳性标本检出。 　　结论：对丙肝患者的血清抗HCV使用ELISA法进行检测，不但灵敏度高，且特异性突出，操作简单方便，值得临床推广。 　　关键词：ELISA法丙肝血清中抗HCV 　　【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）09-0160-01 　　随着人们生活节奏加快以及饮食结构变化，很多疾病均呈现出不断升高的趋势，其中丙型病毒性肝炎（丙肝）对人们的身体健康以及生活质量造成了严重的威胁，该病毒主要通过输血、肾移植、静脉注射毒品、血透析以及性传播等方式传染，临床主要表现为肝脏慢性炎性反应以及出现纤维化等。当HCV（丙肝病毒）进入到人体内之后会出现病毒血症的情况，在患者整个病程中会间断性的表现出来。在受到病毒感染后的第1周就可以使用PCR检测方法在患者的血液还有肝组织当中将HCV RNA检测出来；在第2周的时候则能够使用ELISA法对其抗HCV进行检测。为了更加深入的了解对丙肝患者使用ELISA法检测血清中抗HCV的临床效果，对我院2010年-2012年收治的丙肝患者临床资料进行分析。现总结如下。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料。选自我院2010年-2012年收治的丙肝患者共30例。其中男性患者19例，女性患者11例；年龄最大的为50岁，年龄最小的为22岁，患者的平均年龄为38.6岁。另选同期本院体检结果显示为健康的正常人共30例，其中男性18例，女性12例；年龄最大的为48岁，年龄最小的为22岁，其平均年龄为38.3岁。 　　1.2检测试剂与仪器。本次研究试剂选择珠海丽珠生产的IgM检测试剂盒，其中共有96人份的酶标板，每升40Iu的标准品、塑料膜板盖、进行空白对照，标准品稀释缓冲液，底物A与B，终止液以及样品稀释液等。抗HCV金标试纸条则产自英科新创科技有限公司。本次研究所用仪器为美国伯乐1575洗板机、美国伯乐680酶标仪。 　　1.3检测方法。将本次研究对象的静脉血分离血清，以低温方式保存待检。ELISA法检测步骤主要如下：①在使用之前将所有试剂充分的混匀，注意不要产生泡沫；②将待测样品数量进行统计并以此确定酶标板的数量。每个标准品还有空白孔均需要做复孔。标本通过标本稀释液以1：1的比例稀释，然后在酶标板的反应孔内加入剂量为50uL的标本稀释液。通过棋盘法进行倍比稀释工作，标本浓度每升分别为20、10、5、2.5、0.1IU。然后使用上述方法对阴性血清进行稀释；③将完成稀释之后的标本品还有阴性血清（50uL）分别放入到反应孔里面，然后加入剂量为50uL的生物素标记抗体并将膜板盖上，振荡混匀后在温度为37℃的环境下孵育，时间为1小时；④将孔内液体甩去，在每孔当中将洗涤液加满并振荡30秒，将洗涤液甩去后用吸水纸拍干，连续操作5次；⑤在每个孔内加入剂量80uL的亲和链霉素-HRP振荡混匀后在温度为37℃的环境下孵育，时间为30分钟；⑥在每个孔内加入底物A与B，每样剂量均为50uL，振荡混匀后在温度为37℃的环境下孵育，时间为10分钟；⑦在波长为450nm的地方对各个孔内的OD值进行测试。将检测结果为阳性的标本再通过免疫胶体金试纸条对其进行检测。 　　1.4判定标准[1]。测定孔的OD数值与阴性对照孔的OD值比例超过2.1的判定为阳性，反之则为阴性。 　　1.5统计学处理。本次研究所有患者的临床资料均采用SPSS15.0统计学软件分析，计量资料采用均数加减标准差表示（X±S），计数资料用X2检验，组间对比采用X2检验，P0.05为差异有显著性，有统计学意义。 　　2结果 　　所有患者接受ELISA方法进行检测之后血清结果均显示为阳性，使用胶体金吸附试验进行测试，有24例患者结果显示为阳性，阳性检出率明显低于ELISA方法，有统计学意义（P0.05）；ELISA法对抗原进行检测时浓度每升为1.25IU也能够将阳性标本检出。 　　3讨论 　　慢性丙肝是当前世界性医学的一道重要难题，其有着感染率高以及慢性化的特点，甚至会导致患者出现肝硬化以及肝癌等相关严重疾病。对丙肝患者HCV抗体使用