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实验二十二氨基酸和蛋白质的性质
实验二十二 氨基酸和蛋白质的性质
实验目的了解氨基酸的一些性质,蛋白质的颜色反应,沉淀的反应,以及蛋白质N、S的检验方法。
实验原理 氨基酸为白色晶体化合物,易溶于水而难溶于非极性有机溶剂,熔点高 一般在200以 。氨基酸分子既含有碱性的氨基,又含有酸性的基,因此能形成内盐 偶极离子或两性离子 。 内盐 偶极离子或两性离子 自然界中发现的氨基酸已有很多种,其中绝大部分是脂肪族氨基酸,而且绝大部分是L型的。它们当中有20多种是蛋白质的基本组成单位。本实验是以甘氨酸 氨基乙酸 为代表了解氨基酸的一些性质。
蛋白质是高分子有机物氨基酸氨基酸一些蛋白质在水中能形成胶体溶液。如果加入硫酸和酒精等,盐析。在一些物理因素或化学因素的影响下,。蛋白质结构复杂,不同的蛋白质具有不相同的性质也显示出一些共同的性质,如缩二反应药品
甘氨酸 1%硫酸铜溶液乙醇 浓氢氧化溶液乙醚 2%氧化汞 毒品! 浓盐酸 5%硝酸银溶液碳酸铜 饱和醋酸铅溶液亚硝酸 硫酸三氯化铁饱和单宁酸 新配制 浓硝酸饱和氢氧化钾酒精溶液 10%磷钨酸溶液40%氧氧化钠溶液5%醋酸 鸡蛋白溶液米伦实验操作一氨基酸的性质 溶解度试验在三支试管中各加0.1克甘氨酸固体粉末, 再在一试管里逐次加3m1水 一次加lml ,振荡,观察。在另两试管里分别加3m1乙醇和乙醚 不超过3m1 ,振荡后,视察现象。 与酸作用生成盐取一支试管内放0.5克甘氨酸,加将到沸腾的浓盐酸数滴使其溶解,冷却混合物,即有盐析出。 与碱作用生成盐取0.5克甘氨酸放小烧杯中,加5m1水,加热溶液,振荡,并加碳酸铜 CuCO3 ,直至不发生气泡为止,即有甘氨酸铜生成,煮沸混合物,将溶液倾倒试管中,甘氨酸铜蓝色晶体析出。 与三氯化铁的颜色反应在一支试管里放0.1克甘氨酸,加lml水使其溶解。在另一试管里放lml水,然后在每试管中各加5滴三氯化铁溶液,比较两支试管里溶液颜色的深浅。 与亚硝酸的反应取在冰水中冷却的10%亚硝酸钠溶液,放试管里,加lml稀盐酸。当气泡发生停止时,加粒甘氨酸晶体,气泡又发生。为什么?
蛋白质的性质 色反应 二缩反应取2m1蛋白溶液置于试管中,加2ml 10%氢氧化钠溶液,再加2滴硫酸铜溶液,即有美丽的紫色出现 注意应避免加过量的硫酸铜,以防止硫酸铜在碱性溶液中生成沉淀而遮蔽了所生成的颜色 。缩二反应显示蛋白质分子中有键存在。 米伦反应[1]取2m1蛋白溶液置于试管,加5滴米伦试剂,加热至沸,观察其颜色变化。含有HOC6H4- 基的蛋白质有此反应。
黄蛋白反应取2m1蛋白质溶液置于试管中,加浓硝酸5滴,加热至沸12min,观察颜色。再加浓氢氧化使成碱性后,有何变化? 蛋白质分子中若含有苯环 例如含有酪氨酸或色氨酸等的基团 才有此反应。取m1蛋白质溶液置于试管中,加5滴,置~观察其颜色变化。 ②沉淀反应 与生物试剂的反应取三试管各加1m1蛋白质溶液,各加2滴5%醋酸使呈酸性 这种沉淀反应宜在弱酸性溶液中进行。然后分别加入三氯醋酸、单宁酸、磷钨酸溶液数滴,至有沉淀发生为止。同时注意摇动。不必多加沉淀剂,因为所有沉淀能溶于过量的试剂。
与重金属盐的反应: 取三支试管各加入蛋白质溶液ml,再分别加氯化汞 毒品! 、硝酸银及醋酸铅溶液滴,观察有何现象?蛋白质氮、硫元素的检验 用碱分解蛋白质 。 取2ml蛋白质溶液放入试管,加4ml 40%的氢氧化钠溶液,煮沸至析出沉淀后又复溶解。此时应有氨气产生。嗅过气味,并用润湿的红色石蕊试纸在试管口上检试。然后将此混合液加入2ml 5%的醋酸铅溶液,并将混合物加热煮沸23min,出现褐色或黑色沉淀即表明有硫化铅生成。 [1]米伦试剂即硝酸汞试剂,它的制法是将2克 0.15毫升 金属汞溶在3ml浓硝酸 比重lA 中,然后将制得的溶液水稀释至l0ml
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