探讨高污染场址戴奥辛生物检测法之适用性.doc

探討高污染場址戴奧辛生物檢測法之適用性 Application of a fast-screen dioxins bioassay in a hotspot area 研究生：黃志羽 Huang, Chih-u 指導教授：趙浩然 Chao, How-Ran 【摘要】 國內目前尚有受高濃度戴奧辛 Dioxin 污染的場址，因受污染面積廣大，光使用高解析氣相層析儀/高解析質譜儀 High??resolution gas?chromatography/ High resolution mass spectrometer, HRGC/HRMS 進行檢測，不但會程耗費時間且分析成本偏高，若遇到大量且高濃度樣品時，會缺乏時效性及耗費過多的社會成本。歐美日等國家已開發出冷光酵素報導基因法 Chemical Activated LUciferase eXpressionCALUX ，此方法主要用離體的冷光基因表現，藉由戴奧辛類化合物與多環芳香烴受體 Aryl hydrocarbon Receptor, AhR 結合，經轉譯、轉錄後產生冷光蛋白偵測戴奧辛濃度。與HRGC/HRMS相比較，此生物檢測法可快速、高效率篩檢環境中受戴奧辛污染的樣品。本研究將利用人類肝腫瘤細胞進行CALUX方法改良，將此方法定義為DRE-Luciferase bioassay。利用2,3,7,8-TCDD標準品、液態標準品、粉末標準品進行DRE-Luciferase bioassay檢測法的穩定性及準確性，利用此方法檢測高污染場址中的20個底泥樣品及45個土壤樣品中的戴奧辛總毒性當量，以及分析戴奧辛在底泥粒徑及土壤粒徑中之分布情形。DRE-Luciferase bioassay的偵測極限為8.05 pM，檢測液態標準品與粉末標準品的實測值分別與液態標準品的實際值與粉末標準品的HRGC/HRMS測值關聯性良好，且無低估出現，比值平均分別為3.4、6.3。20個底泥樣品濃度界於2~9675 ng-DL-TEQ/ kg d.w.，45個土壤樣品濃度界於28~215107 ng DL-TEQ/kg d.w.。本次生物檢測法臨界值定為1445 ng DL-TEQ/kg d.w.，安全值定為1000 ng DL-TEQ/kg d.w.，超過臨界值之樣品確定超過管制標準，低於安全值確定為低於法規標準，共有36個底泥 n 6 、土壤 n 30 樣品超過臨界值，8個底泥 n 1 、土壤 n 7 樣品介於安全值與臨界值之間，此8個底泥、土壤樣品則需進一步利用HRGC/HRMS精準定量濃度，以利後續整治行為。 關鍵字：戴奧辛 Dioxin 、CALUX、底泥、土壤 【Abstract】 Recent techniques for detection and quantification of dioxins and dioxin-like compounds involve mainly the costly and time-consuming high-resolution gas chromatography/high-resolution mass spectrometry HRGC/HRMS . To ensure environmental safety, it is extremely crucial to develop high-throughput assays for screening potential contamination of dioxin-like chemicals in various field samples from environments. The Chemical Activated LUciferase eXpression CALUX bioassay is an in vitro luciferase-reporter-gene assay for detecting the Toxic Equivalents TEQ levels of dioxins and dioxin-like compounds based on their high affinity with aryl hydrocarbon receptor AhR . Compared with HRGC/HRMS, CALUX bioassay is a rapid and low-cost screening method particularly for fast-screen identification of highly dioxin-contaminated samples from environment and foods.