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编写说明 生理学、病理生理学、药理学、中药药理学同属于机能学科和实验性学科，是中医院校基础医学中的四大主干课程。这四门课程实验方法和手段有许多共同之处，理论知识更是相互沟通，具有很强的连贯性。 本书的目的在于编写以基本实验为基础、以相关学科综合实验为核心、集四大机能学科实验及相关理论为一体、涵盖科研基本方法与技能的新型机能实验教材。注重由过去的理论验证转变为能力培养。 全书共分为四部分：第一部分为基础实验，即四门课程开设的传统、经典实验；第二部分综合实验，按人体系统多学科融合，形成机体各功能系统生理学特征与调节、病理生理学变化指标检测、药物干预为一体的整体化综合实验；第三和第四部分为实验设计及网络与医学文献分析，目的在于培养学生对中西医多学科知识的综合运用和思维能力的发展。 第一部分 基础实验 实验一　坐骨神经腓肠肌标本制备 【实验目的】 学习生理学实验基本的组织分离技术；学习和掌握制备蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的方法；熟悉刺激、兴奋、兴奋性和可兴奋细胞的概念。 【实验原理】 生理学上把能引起生物体产生反应的环境变化称为刺激。刺激的种类很多，有化学、机械、温度以及声、光、电等。由于电刺激仪器提供的电刺激操作方便，各种刺激参数易于控制，而且一般能引起组织兴奋的电刺激不造成组织损伤，且可重复使用，因此在实验室中常采用各种形式的电刺激。生物体对刺激引起的反应有两种表现形式：一种是由相对静止转变为活动，或由弱的活动变为强的活动，称为兴奋；另一种是从活动状态转变为相对静止，或由强的活动变为弱的活动，称为抑制。将一切活细胞、组织或机体对刺激产生反应的能力，称为兴奋性，它被认为是各种活的生物体所具有的共同特性。由于神经、肌肉和腺体对刺激的反应表现特别明显，因而这三种组织习惯上被称为可兴奋组织,其组成细胞称为可兴奋细胞。 两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物近似，但其离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握。若将蟾蜍或蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，其兴奋性在几个小时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激，可在神经和肌肉上产生一个动作电位，肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次，表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在生理实验中常用蟾蜍或蛙的离体组织或器官作为实验标本，如用蟾蜍的坐骨神经-腓肠肌标本来观察神经、肌肉的兴奋、兴奋性；刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征等。因此，制备坐骨神经腓肠肌标本是生理实验中必须掌握的一项基本技能。 【实验对象】　 蟾蜍或蛙。 【实验器材和药品】　 蛙手术器械1套(粗剪刀、组织剪、眼科剪、圆头镊、眼科镊、金属探针、玻璃分针、蛙钉、蛙板，玻璃板)、滴管、培养皿、烧杯、手术丝线、棉花、锌铜弓、任氏液。 【实验步骤和方法】 （一）制备离体坐骨神经腓肠肌标本 1.破坏脑和脊髓　 取蟾蜍1只，用自来水冲洗干净。左手握住蟾蜍，用拇指按压背部，食指按压头部前端，使头前俯。右手持金属探针由头部前端沿正中线向尾端触划，当触划到凹陷处，即枕骨大孔所在部位。将金属探针由此处垂直刺入枕骨大孔，然后折向前刺入颅腔并左右搅动，充分捣毁脑组织。再将金属探针抽回至进针处，再折向后刺入脊椎管，反复提插捣毁脊髓。如果蟾蜍下颌呼吸运动消失，四肢松软，表明脑和脊髓已完全破坏。否则，须按上法再行捣毁 （见图1-1）。 图1-1 破坏蟾蜍脑脊髓 2.剪除躯干上部及内脏　 左手捏住蟾蜍脊柱，右手持粗剪刀在骶髂关节水平以上0.5～1cm处剪断脊柱，再沿脊柱两侧剪开腹壁，使躯干上部与内脏自然下垂，剪除躯干上部和所有内脏，留下后肢、骶骨、部分脊柱及紧贴于脊柱两侧的坐骨神经（图1-2）。 图1-2 剪除躯干上部和所有内脏 3.剥皮及分离下肢 左手用圆头镊捏住脊柱断端(注意不要压迫神经)，右手捏住断端皮肤边缘，向下牵拉剥掉全部后肢皮肤（图1-3）。用任氏液冲洗下肢标本，然后沿正中线用粗剪刀将脊柱及耻骨联合中央剪开两侧下肢，并完全分离。将两下肢标本置于盛有任氏液的培养皿内备用。洗净手及用过的器械。 图1-3 剥去皮肤 4.制备坐骨神经腓肠肌标本 （1）游离坐骨神经 取一侧下肢标本腹面朝上放置于玻璃板上，用玻璃分针沿脊柱旁游离坐骨神经，并于靠近脊柱处穿线、结扎并剪断。轻轻提起扎线，用眼科剪刀剪去周围的结缔组织及神经分支。再将标本背面朝上放置，将梨状肌及周围的结缔组织剪去。在股二头肌与半膜肌之间的缝隙处（图1-4 A），即坐骨神经沟，找出坐骨神经大腿段。用玻璃分针仔细剥离，边剥离边剪断坐骨神经所有分支，将神经一直游离到腘窝。 图1-4 分离坐骨神经、坐骨神经-腓肠肌标本 （2）完成坐骨神经腓肠肌标本 将游离干净的坐骨神经轻轻搭在腓肠肌上，在膝关节周围剪去全部大腿肌肉，并用粗剪刀将股骨刮干净，在股骨中段剪断股骨。在跟腱处穿线并结扎，