第五讲核酸的分子杂交13.10.)资料.pptVIP

Western blot 原理： western blot 结果： western blot 九、荧光原位杂交（FISH）技术及其在医学上的应用 荧光原位杂交 (Fluorescence in situ hybridization , FISH) 是一种在放射性原位杂交基础上发展起来的非放射性原位杂交技术，是把生物素或地高辛(DIG)等标记物质标记的DNA片段作为探针（probe），与染色体DNA进行分子杂交，利用荧光色素为检测信号，在荧光显微镜下直接检测探针互补的DNA片段的存在部位。 实际上是分子生物学与细胞生物学交叉结合而形成的一种现代生物技术，属于分子细胞生物学的范畴。 FISH技术现已成为分子生物学与分子细胞遗传学研究中的重要手段。 （二）FISH的基本原理 依据碱基互补原理，将DNA探针用特殊修饰的核苷酸分子标记（如biotin-dUTP或digoxigenin-dUTP），然后将标记探针直接杂交到染色体或DNA纤维切片上，再通过直接检测（荧光素直接标记的探针）或用荧光素分子藕联的单克隆抗体与探针分子特异性结合来间接检测DNA在染色体或DNA纤维上的定位。 FISH基于免疫组织化学（抗原抗体反应，即与荧光素偶联的抗体和抗原结合）与分子杂交原理。 （三）用于FISH的探针类型 a. 着丝粒探针(centromeric probe)