Bio-RAD荧光定量PCR仪使用.docVIP

Bio-RAD荧光定量PCR仪使用步骤 以Bio-RAD公司提供的测试试剂盒为例，配制20uL的real-time PCR反应体系，各组分体积比例如下（共4个组分）： 组分 体积 共20ul super Mix 含聚合酶，荧光染料，PCR反应Buffer 10uL Primer Mix 上下游引物混在一起 0.2uL 水 8.8uL 模板 1uL 注意：配各个master的时候，要多计算一孔。例如6个sample，实验需24孔，则预配制25孔的master，即上述各组分体积×25倍。 震荡混匀后瞬时离心以利管壁液体落入管底，分装入96孔板或384孔板（20uL/孔），置于Bio-RAD荧光PCR仪进行扩增。 电脑操作简要步骤如下： 打开桌面图标→根据仪器上写的是CFX96还是CFX384，选择仪器类型，点击OK→在随后出现的主页面中点击中上部的新建按钮（碎花图标）→出现状态栏，步骤设定，运行这3个可选择窗口，在步骤设定里设好程序后确定，进入状态栏运行即可。 注意事项： 开PCR仪盖时，按开盖按钮，关PCR仪盖也是按同一个按钮，勿用手关。 仪器运行的时候，不要关闭已打开的窗口。