第三十章DNA的重组.docVIP

第章 DNA的重组 简答题 1．请叙述克隆一个DNA片段的基本方法。 2．何谓限制性内切酶和甲基化酶？它们的功能是什么？ 3．何谓DNA克隆的载体（vector）？载体DNA应具备哪些特征？ 4．质粒（plasmids） 为什么可作为载体DNA？ 5．试比较噬菌体A和质粒作为克隆载体的优缺点。 7．请介绍农杆菌中Ti质粒的特性。 8．何谓基因文库？建立 DNA文库（基因组文库）的基本方法是什么？ 9．何谓CDNA文库？如何建立CDNA文库？ 10．何谓菌落原位杂交？ 答案 1. 　（1）选择合适的限制酶，以便定点切割靶DNA和载体DNA。 　（2）选择能够进行自我复制的小分子DNA，如质粒或病毒作为载体DNA。 　（3）制备所需要的DNA片段。 　（4）用DNA连接酶连接载体DNA和目的基因，使它们形成重组DNA分子。 　（5）选择合适的方法把重组 DNA分子送入细胞，由细胞提供 DNA复制的环境条件。另外，还要选择一种能够检测重组DNA是否进入细胞的方法，即筛选含重组子的细胞克隆。用于完成上述步骤及有关任务的方法统称为重组DNA技术。 2．限制性内切酶存在于许多种细菌中。这些限制酶的功能是识别和降解外来的 DNA，而细胞本身的DNA不被切割。这是因为存在限制性内切酶的细胞中还有另一种酶即共座甲基化酶，它能识别限制性内切酶所识别的核普酸序列，并把其中的某些