米氏凯伦藻在三种无机氮源的生长情况 .docVIP

米氏凯伦藻在三种无机氮源的生长情况 吕颂辉1，黄凯旋2 1. 暨南大学赤潮与水环境研究中心，广东 广州 510632；2暨南大学水生生物研究中心，广东 广州 510632 米氏凯伦藻引发的赤潮危害鱼类和无脊椎动物，给养殖业带来严重的经济损失，研究其营养生理生态，对掌握该藻形成赤潮的规律有着重要的意义。采用一次培养的实验方法研究了米氏凯伦藻（Karenia mikimotoi Hansen）在三种无机氮源不同氮磷浓度比(cN/cP)下的生长情况。结果表明：在分别以氯化铵、硝酸钠和亚硝酸钠为氮源时，米氏凯伦藻生长的最适cN/cP比分别为32、32和100。米氏凯伦藻对氯化铵的利用效率相对低于硝酸钠和亚硝酸钠，以氯化铵为氮源该藻生长缓慢，细胞密度低；而分别以硝酸钠和亚硝酸钠为氮源时该藻生长情况较好，可较长时间维持高的细胞密度。 米氏凯伦藻；氯化氨；硝酸钠；亚硝酸钠；氮磷浓度比 中图分类号： 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2007）0-1337-05米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi Hansen)属于裸甲藻目（Gymnodiniales），（Kerenia），，赤潮发生和演替中的作用对探究赤潮的成因和防治具有重要的理论意义和实用价值[5]。本文选取的营养盐为无机氮源，以观察藻种种群的生长周期为主，研究不同无机氮源下米氏凯伦藻的生长特性。无机氮是海洋浮游植物生长繁殖必不可少的营养元素，溶解态无机氮主要包括NH4-N、NO3-N、NO2-N。Ｎ2，只能以NH4-N、NO3-N、NO2-N为氮源，单细胞藻类对各种氮源的利用具有不同特点，许多学者认为藻类最优先利用铵盐，然后是硝酸盐、尿素和亚硝酸盐。海水中氮磷的增加与赤潮的发生存在一定的关系，同时氮磷浓度含量的比率也是影响海洋浮游植物群落组成的重要因素之一，不同的氮磷浓度比影响藻类细胞的生长速率和细胞内物质的合成。海洋中的浮游植物按一定比例利用海水中的氮磷，这一恒定比例称为Redfield系数（cN/cP=16）。海水中营养盐摩尔比值偏离Redfield系数过高或过低，均可导致浮游植物的生长受到某一相对低含量元素的限制，并且不同的浮游植物有各自适合细胞生长繁殖的最佳氮磷浓度比。根据Redfield系数，藻类在生长时按16：1的比例吸收海水中的氮磷，也有研究表明规范的Redfield系数并不是适合于所有浮游植物，不同浮游植物利用氮磷的比例存在一定差别[6-9]。为了解米氏凯伦藻氮营养生理特征，本文在实验室条件下采用一次培养的方法，研究米氏凯伦藻在不同无机氮源（NH4-N、NO3-N、NO2-N）及不同氮磷比下的生长情况。 (Karenia mikimotoi Hansen)分离自南海赤潮高发海域，暨南大学赤潮与水环境研究中心藻种室 1.2 培养条件 氮营养实验所用的器皿均以5％的HCl浸泡过夜，超声波洗涤机清洗后以去离子水反复冲洗，灭菌后备用。其余实验所用的器皿用自来水洗净后，以蒸馏水反复冲洗，灭菌后备用。培养基经121 ℃高压蒸汽灭菌20 min后备用。NH4-N、NO3-N、NO2-N实验 1.4.2 数据处理 根据公式μ 求出比生长率，表示初始细胞密度，X表示隔天后细胞密度。运用SPSS 13.0软件对所得细胞密度均值进行多重比较统计分析（LSD法）。 2 结果 2.1 米氏凯伦藻在不同NH4-N浓度的生长情况 图1 不同NH4-N米氏凯伦藻的生长曲线 Fig. 1 Growth of K. mikimotoi at different NH4-N levels 以NH4-N为氮源，米氏凯伦藻在cN/cP为32和100时，细胞密度可以达到1×103 的水平（图1），持续的时间分别为6和4。米氏凯伦藻细胞长18～37 μm，宽14～35 μm[10]，根据现有的赤潮评价标准[11]，此细胞大小的米氏凯伦藻其细胞密度达到1×103 以上时，即可以形成米氏凯伦藻赤潮。cN/cP为100时细胞密度达到最高值的时间比cN/cP为32的延迟了3至4，这可能与高浓度的铵盐有抑制藻类生长的作用有关。当cN/cP为1、4和16时，藻细胞密度增长不明显，生长平缓，较早进入衰亡期。图2显示，cN/cP为32时其比生长率0.27 d-1为最大值。细胞密度均值统计分析表明：cN/cP为32时与对照组细胞密度差异极显著（P 0.01），且与cN/cP为1时存在差异（P 0.05）；cN/cP为100时与对照组细胞密度差异显著（P 0.05）。综合细胞密度和比生长率两个指标，以NH4-N为氮源，cN/cP为32时最适于米氏凯伦藻生长。 图2 不同NH4-N米氏凯伦藻的最大比率 Fig. 2 Specific grow