自体CIK细胞过继性免疫治疗对晚期恶性肿瘤的临床疗效研究.docVIP

自体CIK细胞过继性免疫治疗对晚期恶性肿瘤的临床疗效研究 　　【摘要】目的：探讨自体CIK细胞过继性免疫治疗对晚期恶性肿瘤的临床疗效。方法：选择42例晚期恶性肿瘤患者作为研究对象，抽取50ml外周静脉血，分离单个核细胞，然后加入抗CD3单抗、IL-2、IFN-γ等细胞因子对其进行12～15d细胞培养，成功诱导扩增CIK细胞后分3次回输患者体内，并对治疗前后临床疗效和毒副反应进行统计学比较，并检测治疗前后患者免疫学指标变化情况。结果：治疗后，患者的癌胚抗原得到下降；失眠、食欲不振、疲倦乏力等临床症状均得到明显缓解（P0.05）；临床治疗有效率高为73.8%；患者外周血中CD3、CD4 T细胞和NK细胞水平均较治疗前显著升高（P0.05），同时毒副反应轻微。结论：自体CIK细胞过继性免疫治疗对晚期恶性肿瘤患者临床疗效确切，能显著提高患者免疫功能，改善临床症状，值得临床推广和普及。 　　【关键词】恶性肿瘤；CIK细胞；过继免疫治疗 　　近年来，生物治疗在肿瘤的基础研究和临床治疗中发挥了越来越重要的作用，目前已成为治疗恶性肿瘤的第四大手段。自体细胞诱导的杀伤细胞（CIK）是一类增殖能力强、对多重耐药肿瘤细胞有很强杀伤活性的肿瘤生物治疗免疫活性细胞，主要表达T细胞标记的CD3细胞和NK细胞标记的CD56细胞。大量基础研究表明[1-5]，连续回输CIK细胞可以在不损伤机体免疫功能的前提下，对肿瘤细胞进行直接杀伤，并且能够提高机体免疫力。自体CIK细胞过继性免疫治疗是一种从肿瘤患者外周血中分离多种效应细胞，体外诱导培养后回输体内，以提高临床疗效，提高生活质量的生物治疗手段。我院肿瘤科近年来对恶性肿瘤患者给予自体CIK细胞过继性免疫治疗，取得了不错的临床疗效，现报道如下。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 以我院肿瘤科2010年6月至2012年2月期间收治的42例晚期恶性肿瘤患者为研究对象，均经病理或细胞学检查确诊为恶性肿瘤，根据国际抗癌联盟制定的《恶性肿瘤 INM分类法》肿瘤分期标准，所有病例均为Ⅲ、Ⅳ期，均有可测量的肿瘤病灶，预计生存期均3个月，Karnofsky评分≥60分。其中男性24例，女性18例，年龄36～82岁，平均年龄（58.3±9.6）岁。肺癌14例，结肠癌8例，原发性肝癌6例，直肠癌5例，乳腺癌4例，其它5例。行CIK细胞治疗前有30例接受过化疗，占71.4%，有12例接受过放疗，占28.6%，放化疗与CIK细胞生物治疗间隔均在1月以上。合并严重肝肾功能不全、急慢性感染、精神障碍、免疫系统疾病等患者均已排除在外。接受治疗前均已签署治疗知情同意书。 　　1.2方法 　　1.2.1CIK细胞体外培养 清晨空腹状态下抽取外周静脉血50ml，以淋巴细胞分离液分离出单个核细胞，洗涤3次后用含10%人AB血清的RPMI1640培养基调节密度至1～2×106/ml后进行培养。培养箱内条件设为： 37℃，5%浓度的CO2。培养第1d加入重组人IFN-γ，浓度调至2000U/ml；第2d加入rhIL-2，调节浓度至1000U/ml，并加入浓度为50ng/ml的CD3MaAb。定期更换培养液，1次/3d，记录细胞的生长情况。 　　1.2.2CIK细胞的鉴定与质量控制 单个核细胞培养1周后进行计数，并检测细胞活度，根据培养量计算出CIK细胞总数。对诱导培养扩增的CIK细胞进行细胞表型分析和细胞杀伤活力测定，同时对安全性进行评价。 　　1.2.3细胞回输 细胞培养13～15d后，收集合格的CIK细胞，洗涤3次，配成250ml液体（含5%的人血白蛋白、1000U/ml的IL-2）后回输入患者体内，每次回输细胞总量2～5×109，1次/2d， 1疗程/3次。 　　1.3观察指标 ①分别于治疗前后应用电化学发光免疫分析仪（型号：Elecsys 2010型；生产厂家：罗氏公司）检测患者肿瘤标志物癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）水平变化，同时用流式细胞仪测定外周血T细胞亚群等免疫学指标变化情况。②观察治疗后患者临床症状改善情况，包括睡眠、食欲、精神状态等。评价标准：显著改善（临床症状积分值下降≥2/3）、部分改善（积分下降在1/3～2/3之间）、无改善（积分下降1/3）。③治疗后参照实体瘤疗效标准，结合B超、CT等常规检查对临床疗效进行评价，分完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、轻度缓解（MR）、稳定（SD）、进展（PD），CR、PR、MR计为有效率。④观察患者在回输过程中、2h内的毒副反应情况，包括发热、乏力、皮疹、呕吐、烦躁等。 　　1.4统计学处理 应用SPSS17.0软件对数据进行统计分析，计量资料应用t检验，计数资料应用c2检验，检验标准以P0.05表示有统计学意义。 　　2结果