论文名称(中文) 探讨p62sequestosome.docVIP

論文名稱 中文 探討p62/sequestosome-1蛋白促進登革病毒複製的角色 論文名稱 英文 The facilitating roles of p62/sequestosome-1 protein in dengue virus replication 研究生 中文 李兆和 研究生 英文 Chao-Ho Li 中文摘要 登革熱是一個再度興起的傳染病，遍布在超過100多個國家，包含非洲、東南亞、美洲以及西太平洋等等都可發現它的傳染。因為全球暖化的現象，登革病毒感染的威脅正在增加中。登革病毒感染後會引起發燒、出血甚至伴隨休克症候群的出血症狀。細胞自噬是一種細胞中代謝的機制，用以分解受損的胞器以及錯誤堆疊的蛋白，這個機制被指出會協助登革病毒的複製。最近一篇文獻顯示辛德畢斯病毒會和細胞自噬中的攜帶蛋白p62作用而導致被細胞自噬所清除。但在我們的實驗卻顯示p62似乎會協助登革病毒複製。相較於登革感染的野生型小鼠纖維母細胞，在p62蛋白缺陷時，感染登革病毒後所偵測到的病毒蛋白、釋出的病毒顆粒及病毒RNA都較少。而在穩定表現登革基因細胞中，p62蛋白的表現量降低也會顯著地抑制登革病毒蛋白的產生。這個p62蛋白協助登革病毒複製的角色不只侷限小鼠纖維母細胞中，也同樣可以在肝細胞及單核球細胞中發現。而在野生型或p62蛋白缺陷細胞中，病毒與受器結合、細胞內噬、干擾素活化、啟動細胞自噬的程度並沒有差異。另外，因p62蛋白缺陷所導致的油滴堆積也不是抑制登革病毒複製的原因。但當p62蛋白缺陷細胞被登革病毒感染後，NF-κB會高度磷酸化及入核，而在p62蛋白缺陷細胞中若藉由抑制劑BAY 11-7082來抑制NF-κB活化後，則可以恢復登革病毒在p62蛋白缺陷細胞中的複製。此外，我們也發現p62蛋白缺陷細胞在被登革病毒感染後，活化的NF-κB會引發高量IL-6分泌。而從共軛焦顯微鏡中發現p62蛋白會與登革病毒的prM、E、NS2A及NS3蛋白共位的結果，暗示p62蛋白可能會與這些病毒蛋白作用而協助病毒複製。我們發現了p62蛋白在登革病毒複製上的新角色，也提供了一個未來在登革病毒感染下以p62來當作標靶來治療的可能。 英文摘要 Dengue is a re-emerging disease which is endemic in more than 100 countries throughout Africa, South-East Asia, America, and the Western Pacific. Due to global warming effects, the dengue virus DV threat is broadening in the world. The symptoms are febrile illness called dengue fever to dengue hemorrhagic fever and dengue shock syndrome. Autophagy, a cellular catabolic system responsible for damaged organelles and misfolded proteins degradation, is reported to facilitate DV replication. A recent study showed that sindbis virus is associated with an autophagy adaptor protein p62 that leads to elimination of virus by autophagy. However, our data here indicate that p62 seems to be required for DV replication. Compared to WT MEF cells, less virus proteins, released DV particles and DV RNA were detected in DV-infected p62-deficient MEF cells. Significant decreased DV protein translation was also observed in p62 knockdown DV-replicon stable expressing cells. This facilitating role of p62 to DV replication is not limited in MEF cells but also in hepatocyes and m