培训课件-MHC多聚体分子免疫学A.pptVIP

抗原特异性T细胞的检测方法 传统功能实验 依赖于抗原特异性T细胞在体外的增殖活力及细胞毒效力的功能试验 氚标记胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入率测定T细 胞的增殖水平 MTT法测增殖 Cr51释放法检测T细胞的特异性杀伤功能 LDH法测杀伤 细胞增殖实验原理 加3H标记的DNA前体 (3H胸腺嘧啶苷，3H-TdR) T细胞增殖表现为DNA复制， 细胞合成DNA量倍增 3H-TdR掺入新合成的DNA中 根据掺入的多少 推测细胞增殖程度 细胞杀伤实验原理 靶细胞被特异性杀伤 51Cr释放入培养上清 51Cr掺入培养的靶细胞中， 使其摄入胞内 上清中的辐射强度即可 计算出特异性CTL的杀伤效率 传统功能实验定量检测T细胞功能 有限稀释法（LDA） 将T细胞有限稀释为单个细胞 利用功能实验检测有功能的T细胞数目 计算抗原特异性T细胞的前体频率 细胞内细胞因子染色检测T细胞功能 T细胞接受抗原特异性刺激后发生分泌细胞因子的功能效应 通过检测分泌细胞因子的T细胞检测抗原特异性的T细胞 ELISPOT法检测抗原特异性T细胞 检测的细胞分泌细胞因子 抗细胞因子抗体包被固相载体 加入酶标细胞抗体，显色 阳性斑点代表特异性T细胞 几种定量检测抗原特异性CTL的方法比较 方法 分析类型 功能 限制 LDA 功能分析 细