分子病毒学-.doc

3、论述机体 脊椎动物 抵抗病毒入侵的分子机制。什么是核酸疫苗？简要概述其研究进展 1500字左右 30分 。 一机体抵抗病毒入侵的分子机制 1、免疫 病毒是一种极具感染性和传染性的病原微生物，当病毒感染机体以后，机体会通过激活免疫系统来进行防御。高等哺乳动物的免疫系统分为两大类：特异性免疫系统和非特异性免疫系统。以流感病毒为例，阐述机体抵抗病毒入侵的分子机制 2、非特异性免疫应答 流感病毒感染的早期，首先引起防御屏障、吞噬细胞、干扰素和NK细胞等为主的非特异性免疫。 1 防御屏障作用：在感染的初期，呼吸道粘膜及其分泌物等构成第一道防御屏障，阻挡流感病毒的侵入，再通过纤毛的摆动，排除病毒； 2 吞噬细胞的作用：当第一道防线不足以阻挡病毒的入侵时，病毒则侵入呼吸道粘膜下组织，此时局部的吞噬细胞吞噬病原体。活化的吞噬细胞释放大量的促炎因子和炎症介质，进一步增强免疫应答和炎症反应； 3 干扰素的作用：干扰素可通过诱导细胞合成抗病毒蛋白 AVP ，该蛋白抑制病毒的复制、限制病毒的扩散。在感染的起始阶段特异性免疫尚未形成之前，干扰素发挥重要的抗病毒作用； 4 NK细胞的作用：在干扰素和细胞因子的诱导下，NK细胞即可活化，活化的NK细胞直接与病毒感染的细胞 靶细胞 接触，并通过释放穿孔素裂解靶细胞，达到抗病毒的作用。 特异性免疫应答 特异性免疫，又称获得性免疫，主要由免疫器官 胸腺、淋巴结和脾脏等 和免疫细胞 淋巴细胞 组成，其中，淋巴B细胞“负责”体液免疫；淋巴T细胞“负责”细胞免疫。 .1 细胞免疫应答 病毒感染属细胞内感染，所以细胞免疫的作用尤为突出。流感病毒侵入机体后，依靠血凝素 HA 吸附于宿主细胞表面，经过吞饮进入胞浆后在其内合成病毒蛋白而成为内源性抗原，然后与MHC-1类分子结合成抗原肽—MHC-1类复合物，表达于细胞膜上，供CD8+T细胞识别，该细胞称抗原提呈细胞 APC 。APC膜上的抗原肽—MHC-1类复合物与T细胞表面的抗原受体 TCR 特异性结合，使T细胞活化、增殖、分化为细胞毒性T细胞 CTL 。CTL可通过抗原受体识别流感病毒感染的 靶细胞 细胞，然后释放穿孔素和颗粒酶等物质，攻击和杀伤靶细胞，达到清除或释放在细胞内复制的病毒体，从而在抗体的配合下清除病毒。 .2 体液免疫应答 体液免疫主要作用于细胞外游离的病毒。流感病毒侵入机体后，B细胞膜上的抗原受体 BCR 与其特异性结合，成为B细胞活化的信号，使B细胞活化、增殖、分化为浆细胞，浆细胞在流感病毒抗原的刺激下合成并分泌具有抗病毒效应的抗体。体液免疫中产生的抗体主要有 1 病毒中和抗体：该抗体能与细胞外游离的病毒结合，封闭其细胞受体结合的病毒抗原表位或改变病毒表面抗原构型，阻止病毒吸附、侵入易感细胞。 2 血凝抑制抗体：表面含有血凝素的流感病毒可刺激机体产生血凝抑制抗体，该抗体能中和病毒的感染性。 3 补体结合抗体：此类抗体不能中和病毒感染性，但可通过调理作用增强巨噬细胞的吞噬作用。 核酸疫苗的研究进展 核酸疫苗 核酸疫苗 nucleic acid vaccine ，也称基因疫苗 genetic vaccine ，是指将含有编码某种抗原蛋白的外源基因克隆到真核表达质粒载体上，然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内，并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。 2、核酸疫苗的基本原理 核酸疫苗的免疫机理是在非淋巴系统的组织细胞 如肌细胞 内表达抗原，再被分泌的细胞释放到组织间隙，最终被抗原提呈细胞捕获，加工提呈给T细胞，诱免疫应答，另外一种是抗原提呈细胞直接摄取核酸疫苗，表达抗原并提呈给T细胞，触发免疫应答。核酸疫苗免疫时，肌细胞和抗原提呈细胞均被转染，引起CD4+和CD8+T细胞亚群的同时活化，产生特异性免疫应答。 3、核酸疫苗的制备 抗原基因和载体的制备抗原基因和载体的连接重组DNA分子导入宿主细胞重组子的筛选与鉴定 核酸疫苗的优点 与常规疫苗相比具有显著的优点：易于构建与改造；成本低廉，适于规模化生产；有良好的热稳定性；以自然抗原形式激活免疫系统，产生有效的中和抗体和细胞毒T淋巴细胞反应CT L cytotoxic T cell 反应；核酸疫苗选择性编码病原体基因的一部分而不是全部，不会使免疫宿主具有受感染的风险。 5、核酸疫苗的缺陷 核酸疫苗导入与致癌的可能性：核酸疫苗是介于生物治疗剂与基因治疗剂之间的产品。外源基因导入后，有可能激活内源性原致癌基因，或者使宿主抗癌基因失活，这一可能性不容忽视； 产生抗DNA抗体：可能是由B淋巴细胞增生而产生，或者是由抗原特异性选择引起B淋巴细胞活化而产生； 持续表达外源抗原可能产生不良后果。 核酸疫苗的应用及前景 在核酸疫苗发展的短短几年里，已经在病毒