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有丝分裂难题
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(五校联考)为测定青虾某种细胞分裂的细胞周期,利用3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸短暂培养该种细胞一段时间后,处于S期的细胞都会被标记。洗脱含放射性同位素的胸腺嘧啶脱氧核苷酸,再移至普通培养基中培养,换用无放射性的新鲜培养液培养,定期检测。不同间隔时间取样,找出正处于分裂期细胞的百分数。
A:处于S期的细胞都被3H标记;B:被标记细胞最早进入分裂期;C:50%分裂期细胞被标记且在增加;D:50%分裂期细胞被标记且在减少;E:出现被标记细胞第二次进入分裂期。
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则该种细胞的S期为 ▲ h。
答案:7
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分析:此题涉及到标记有丝分裂百分率法,如果了解这种方法,就可以直接算出7h,即
10.5-3.5=7h。
有关名词:
TG1:G1期的持续时间
TG2:G2期的持续时间
TS:S期的持续时间
TM:M期的持续时间
TC:一个细胞周期的持续时间
PLM:标记的有丝分裂细胞所占的比例
TDR:胸腺嘧啶核苷,是DNA的特异前体,能被S期细胞摄入,而掺进DNA中。通常使用的是3H或者 14C标记的TDR。
测定原理:
② S期细胞经G2期才进入M期,所以一段时间内PLM=0。
③开始出现标记M期细胞时,表示处于S期最后阶段的细胞,已渡过G2期,所以从PLM=0到出现PLM的时间间隔为TG2。
④ S期细胞逐渐进入M期,PLM上升,到达到最高点的时候说明来自处于S最后阶段的细胞,已完成M,进入G1期。所以从开始出现M到PLM达到最高点(≈100%)的时间间隔就是TM。
⑤ 当PLM开始下降时,表明处于S期最初阶段的细胞也已进入M期,所以出现PLM到PLM又开始下降的一段时间等于TS。
⑥ 从PLM出现到下一次PLM出现的时间间隔就等于TC,根据TC=TG1+TS+TG2+TM即可求出的TG1长度。
事实上由于一个细胞群体中TC和各时相不尽相同,第一个峰常达不到100%,以后的峰会发生衰减,PLM不一定会下降到零,所以实际测量时,常以(TG2+1/2TM)-TG2的方式求出TM。???? (浙江省第11届高中生物学竞赛题) 在某生物细胞培养液中加入用3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸,短暂培养一段时间后,洗去3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸。使在该段时间内已处于DNA复制期不同阶段的全部细胞中DNA被3H标记,而当时处于其他时期的细胞则不带标记。不同时间取样做细胞放射性自显影,找出正处于有丝分裂的分裂期(M期)细胞,计算其中带3H标记的细胞占有丝分裂细胞的百分数。得到下图(图1~图4中横轴为时间,纵轴为带标记细胞占总细胞数的百分数):
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(1) 图1中a点开始检测到带3H标记分裂期细胞,则o~a为 期。
(2) 图1中b点带3H标记分裂期细胞数开始达到最大值,则a~b段表示 期。
(3) 图1中c点时,带标记的细胞百分数开始下降,则a~c段所经历的时间相当于 期的时间。
(4) 此后,带标记的分裂期细胞数逐渐减少,直到消失,到第二次出现带有标记的细胞数时为图中e点,则d~e段所经历的时间相当于 时期的时间,因此一个完整的细胞周期的时间相当于 段经历的时间。
答案:(1) G2(或DNA复制后) (2) M(或分裂) (3) S(或DNA复制) (4) G1期和G2期 a~e
解析:一个完整的细胞周期包括间期和分裂期(即M期),间期又可划分为G1期(主要进行RNA和有关蛋白质的合成)、S期(进行DNA分子复制)和G2期(继续合成少量的蛋白质和RNA)。
使处于DNA复制期不同阶段的全部细胞的DNA被3H标记,而处于其他时期的细胞则不带标记。然后找出正处于有丝分裂的分裂期细胞并计时(图3)。
a点,首次出现放射性标记,之前这段时间为G2期。理由:处于DNA复制最后阶段的细胞最先进入分裂期,从而出现带标记的M期细胞,此细胞经过的时间为G2(oa)。
a点后,至b点,从最先开始出现放射性标记(0%)到放射性标记达到最高峰(100%),这段时间为M期。理由:后续的部分细胞相继进入了分裂期,到原处于DNA复制期最后阶段的细胞完成有丝分裂时,分裂期各时刻都有了细胞,故放射性标记开始达到最高峰(100%)。此细胞经过的时间为G2+M(ob),故ab=ob-oa=G2+M-G2=M。
b到c,放射性标记持续为最高峰(100%),ac段时间为S期。理由:放射性标记开始达到最高峰(100%)时,还有部分后续的细胞没有进入分裂期,故100%的最高峰可以持续一段时间。当原处于DNA复制最先时期的细胞开始进入分裂期时,最高峰结束,此细胞经过的时间为S+G2(oc),故ac=oc-oa= S+G2-G2=S。
c到d, 即放射性标记由最高
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