双歧杆菌完整肽聚糖对过敏孕妇脐血来源DC的影响第三稿解析.pptVIP

双歧杆菌完整肽聚糖对过敏孕妇脐血来源树突状细胞的影响 导 师 程 茜 副教授 研究生 聂 晶 过敏性疾病的细胞学机制 国内外研究现状 国内外研究现状 遗传倾向 母亲孕期抗原的暴露 在出生前胎儿的免疫系统已经达到足以引起抗原特异性反应的程度 脐血中IgE的水平与胎儿今后是否发生过敏性疾病相关 胎儿出生后肠道菌群的建立 国内外研究现状 肠道菌群比例的分析，过敏患儿肠道粪便内双歧杆菌数量明显下降,而需氧菌比例增高。差异可持续2年以上。 病例对照和前瞻性研究中发现，婴儿出生一周内粪便中双歧杆菌的数量和成份的变化与其今后是否发生湿疹具有相关性，且病情的严重程度与粪便中双歧杆菌的数量呈负相关。 国内外研究现状 国内外研究现状 课题研究的主要内容 拟解决的主要问题 双歧杆菌WPG的提取 诱导脐血单个核细胞分化为树突状细胞 双歧杆菌WPG与树突状细胞的共培养 理论与实际意义 明确双歧杆菌WPG是否有诱导脐血来源树突状细胞促进T细胞向Th1或Th3方向分化,抑制Th2型过敏性疾病发生的作用 为益生菌细胞成份的开发利用提供理论证据。 技术路线 实验组加入不同剂量WPG 阴性对照组仅加入培养基 阳性对照组Ⅰ组加入GM-CSF+IL-4 100ng/ml 阳性对照组Ⅱ组加入LPS1μg/ml 研究进度与具体时间安排 * * 近年来，过敏性疾病（IgE介导）在人群中的发病率明显上升，儿童更是过敏性疾病的主要累及对象。但是，迄今对过敏性疾病的防治仍没有效措施。 有效的防治方法和最佳时期 一、国内外研究现状 二、课题研究的主要内容 三、拟解决的主要问题 四、理论和实际意义 国内外研究现状 胎儿T细胞分泌各种细胞因子的能力相对于成人不完善，特别是Th1细胞因子低下使胎儿出现“类-Th2状态”,且这种状态可一直持续到胎儿娩出后 在宫内，Th2高功能状态具有避免母子排斥反应和维持妊娠的生理学意义 婴幼儿Th2优势免疫反应是过敏性疾病发病的潜在危险因素 正常及过敏儿Th2细胞因子在宫内及出生后的变化 国内外研究现状 微生物环境 肠道菌群 免疫作用位点 Th1/Th2平衡 过敏性疾病 婴儿湿疹发病率 过敏性皮炎症状改善 防治过敏性疾病 国内外研究现状 提供驱动T细胞克隆扩增的一系列信号 提供Th0细胞向Th1或Th2细胞分化的选择性信号。 受到抗原刺激后的DC分泌的细胞因子提供了初始T细胞分化的细胞因子微环境。 国内外研究现状 树突状细胞(DC)对Ｔ细胞分化的影响 ① DC分泌IL-12、IFN-γ的水平 ② DC刺激T淋巴细胞增埴的能力 双歧杆菌可诱导DC成熟，促进Th1类细胞因子的分泌，稳定的Th1反应，调节Th1/Th2免疫平衡 共培养 本课题组在前期研究中发现 PAMPs PRRs TLR2/4 全身或局部的免疫应答 激活天然免疫系统 WPG 双歧杆菌WPG对树突状细胞成熟及所分泌细胞因子的影响 正常孕妇与过敏孕妇脐血来源树突状细胞在双歧杆菌WPG作用下有无差异 培养第七天 脐血 单核细胞 实 验 组 阳性对照组Ⅰ 阴性对照组 实验组 阴性对照组 阳性对照组Ⅱ 形态学检测 体外混合淋巴细胞反应 流式细胞仪检测细胞表型 ELISA法检测细胞因子 *