生化实验技术与方法解析.pptVIP

PAL总活力、比活力、蛋白质含量的计算 步骤 体积（ml） 蛋白质含量 （mg） 总活力（m） 比活力 （m/mg protein） 粗提 硫酸铵沉淀 透析 离子交换层析 糖的薄层层析 实验目的 学习和掌握薄层层析的原理和方法 实验原理 层析法是利用混合物中各组分物理化学性质的差异（如吸附力、分子形状及大小、分子亲和力、分配系数等），使各组分在两相（一相为固定的，称为固定相；另一相流过固定相，称为流动相）中的分布程度不同，从而使各组分以不同的速度移动而达到分离的目的。 固定相：固定相是层析的一个基质。它可以是固体物质（如吸附剂，凝胶，离子交换剂等），也可以是液体物质（如固定在硅胶或纤维素上的溶液），这些基质能与待分离的化合物进行可逆的吸附，溶解，交换等作用。 流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体等，都称为流动相。柱层析中一般称为洗脱剂，薄层层析时称为展层剂。 按操作形式不同分类： 柱层析：将固定相装于柱内，使样品沿一个方向移动而达到分离。 纸层析：用滤纸做液体的载体，点样后，用流动相展开，以达到分离鉴定的目的。 薄层层析：将适当粒度的吸附剂铺成薄层，以纸层析类似的方法进行物质的分离和鉴定。 层析法的分类 按机理分类： 吸附层析 分配层析 离子交换层析 凝胶层析 亲和层析 薄层层析是一